蝴蝶蘭的組織培養
錄入時間:2009-6-29 15:19:46
來源：betway必威西汉姆联
蝴蝶蘭屬蘭科蝴蝶蘭屬植物，其花形狀奇異清秀，花大豔麗，具有極高的觀賞價值和經濟價值。隨著人們生活水平的不斷提高，蝴蝶蘭的市場需求量也越來越大，但蝴蝶蘭為典型的單莖性熱帶附生蘭，植物很少發生側枝，分株繁殖係數極低。其種子沒有胚乳，自然條件下很難萌發，通過自身的營養繁殖和種子繁殖均不能滿足工廠化育苗的要求。應用植物組織培養技術進行蝴蝶蘭的快速繁殖可以縮短育苗周期，在短時間內獲得大量成株。我們對蝴蝶蘭花梗芽組織培養技術進行研究，取得了很好的效果，為工廠化育苗提供了可能。
1 外植體的選擇和消毒
取蝴蝶蘭花梗在自來水下用細軟毛刷輕刷表麵，並吸幹表麵水分，剪成2 一3cm 長的莖段。在工作台上按以下程序進行滅菌處理：將材料放入經高溫滅菌過的燒杯中；加入70 ％的酒精浸泡20 秒；0 . 1 ％的HgCl 消毒8 分鍾，分2 次進行，每次4 分鍾，滅菌後用無菌水衝洗5 次，每次2 分鍾；用解剖刀切除壞死部分後，接入培養基。用此方法既能有效地消毒又不會對培養材料產生毒害，培養材料接入培養基後無褐化壞死現象出現。
2 無菌材料的試管培養
培養材料的選擇是蝴蝶蘭組培決繁的關鍵。腋芽節位以下第3 、4 節花梗芽是最適宜的外植體，而穀朧甘肽200mg/L既能很好地抑製褐化，又能促進試管苗的生長和分化，是蝴蝶蘭組織培養中最合適的褐化抑製劑。B5+GA32.0mg/L＋NAAO.lmg/L是較適宜的愈傷組織誘導培養基，B5+6BA1.0mg/L＋NAAO.2mg/L是較適宜的分化培養基，1 / 2 MS + IBA1.2mg/L＋NAA0.05mg/L及2 %蔗糖是較適宜的生根培養基。
將消毒後的無菌培養材料接種在愈傷組織誘導培養基上，其培養基為B5+GA32.0mg/L＋NAAO.lmg/L，培養基pH 調至5.8 ，培養室溫度控製在24 士2 ℃ 。接種後遮光放置4 一5 天，而後每天光照12 小時，2 周後，切口處開始膨大，產生淡綠色瘤狀愈傷組織，並不斷增大。4 周後將愈傷組織切下轉接到分化培養基B5+ 6 BA1.0mg/L＋NAA0.2mg/L上，轉瓶後愈傷組織的體積和重量成指數級增加，4 周左右愈傷組織表麵出現較大綠色顆粒，並形成芽點，繼而分化出叢生芽。分化時出現褐化現象，可加入20omg 幾穀朧甘膚解除。當叢生苗長到3 一4cm 、具有4 一5 片葉時，將其移到生根培養基1 / 2 Ms + IBA1.2mg/L十NAAO.05mg/L 2 ％蔗糖上，10 天後切口基部開始出現白色的根狀突起，25 天後，每株生根4 條以上，生根率為95 ％以上。
3 試管苗的煉苗移栽
試管苗移栽前需要有煉苗的過程，移栽前5 天左右，在室內將封口膜打開1 / 3 左右，使幼苗與空氣有一定接觸。2 天後，移栽到馴化溫室內，使幼苗完全暴露在空氣中，要適當遮陽，避免高溫和強光直接照射，3 天後即可移栽。移栽時將幼苗取出，放在1 000 倍的多菌靈水溶液中小心洗去根部的培養基，去掉老葉，放入鋪有濕報紙的盒子，要注意保濕。栽培基質為經過高溫消毒後的苔鮮，用鑷子劃痕後，夾住幼苗根部，插入至第1 輪葉，用手小心壓緊，用薄膜覆蓋，保持溫度在21 一25 ℃ ，相對濕度60 ％一80 % ，控製好水分和溫度，移栽成活率可達90 ％以上。當新葉長出、新根伸長時，每周用0.3 ％一0.5 ％磷酸二氫鉀進行葉麵施肥1 次，成苗率達80 ％以上。
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