金正日球根海棠葉片組織培養誘導的研究

2.1 激素組合對愈傷組織形成的影響

取經無菌處理的外植體在無菌條件下， 分別接種在準備好的 Al ～A 8培養基上， 培養基 p H  5.8 ， 瓊脂 8 g · L^-1 ， 蔗 糖 3 0 g· L^-1  。培 養 條件： 培 養 溫 度

( 2 0 ±2 ) ℃， 光強 12 0 0 l x ， 每天 1 0 ~1 2 h光照， 4周後觀察愈傷組織形成情況。
經實驗分析： 在 Ms 培養基上由於激素種類及含量的不 同， 愈傷組織形成 有差異。總趨勢 附加 6 - B A、N A A或 2 ， 4 - D的各 組分 均形成愈傷 組織， 誘導 率

100% ～8 0%   ； 隨著 NAA的減少 ， 愈傷組織的體積生長變慢， 2 ， 4 - D   0.5   mg· L^-1 對愈傷組織的形成作用比較大， 6 - B A 0.5   mg· L ^-1 的濃度對愈傷組織形成作用 比較大。在 A1 、 A 2培養基由於激素 NAA含量過高， 愈傷組織形成迅速， 但呈薄片，疏鬆。A3培養 由於激素NAA含量減少， 愈傷組織生長緊密， 顏色淺綠， 突起，粗厚。A4沒有激素 NAA， 而添加激素 2 ， 4 -D  0.5   mg·L  形成淡綠色的愈傷組織， 有突起。A5培養基 6 一 B A含量減少為 1.0   m· L ～， 也沒有激素 NAA， 取而代之的是 2 ， 4 - D   0.5   m g · L ^-1   ， 形成淡綠色的愈傷組織， 緊實、 健壯。從試驗情況可以總結出： A3 、 A4 、 A5 、 A6培養基都有利於愈傷組織形成， 且能達到粗厚健壯。也就是 適宜激 素含量 範 圍為 6 - B A  2 ～1mg· L^-1  和 NNA0.5 ～ 0.1   mg． L^-1 。    
2.2 激素含量對不定芽分化影響
40d 後觀察含有不同濃度的外源激素6 一BA 的培養基對愈傷組織形成和芽分化（見表2 ) ，從試驗情況可以看出激素種類、含量對不定芽分化有重要影響。A1 組織死亡是由於6 一BA 、NAA 用量過高，A2 形成愈傷組織後不進行分化生長是由於6-BA 用量高造成的，A3 由於6 一BA 濃度高形成愈傷組織後再分化形成芽，生長時間長。A4 由於2 , 4 一D 的加人形成愈傷組織再發芽因而生長緩慢，6 一BA 高濃度使芽分裂多而細，A7 生長素不足而影響生長田。從苗的質量上看A5 和A6 都可以作為建立無性係的培養基，但從培養的時間上看A6 是最適宜的，A4 和A7 形成的芽細弱，從研究結果可以看出1mg· L^-1的6 一BA 即能滿足愈傷組織不定芽的分化。從實驗可以看出誘導再分化的最佳激素組合是：A6 培養基MS + 6 一BA1.0 + NAAO.5 。
3 結論與討論
在不同激素組合對愈傷組織形成的實驗中，我們配製了的8 種不同激素組合和不同濃度激素的培養基，其中A3 培養基MS + 6 一BA2.O + NAA 0.1 , A4 培養基MS + 6 一BA2.O 十2 , 4 一印D0．5 , A5 培養基MS + 6 一BA1.O 十2 , 4 一D0.5 、A6 培養基MS 十6 一BA1.O 十NAAO.5 有利於愈傷組織形成，配比組合均有利於球根海棠的脫分化即由外植體形成愈傷組織。經實驗篩選出最適合誘導愈傷組織的培養基是MS + 6 一BA1.0~2.0十NAAO.1 ~0.5 。在愈傷組織的保持與不定芽的分化的比較實驗中，A6 培養基MS + 6 一BA1.0＋NAAO.5 有利於愈傷組織的形成和增殖，有利於球根海棠愈傷組織的再分化。

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