一、實驗原理
酵母菌是單細胞的真核微生物,菌體比細菌大而且不運動。酵母菌的繁殖方式分為無性繁殖和有性繁殖兩種,以無性繁殖為主。芽殖是酵母菌普遍的無性繁殖方式,少數為裂殖;有性繁殖是產生子囊和子囊孢子。本實驗是通過美藍染液水浸片和水一碘液水浸片來觀察酵母的形態和芽殖方式。
美藍是一種無毒性的染料,它的氧化型呈藍色,還原型無色。用美藍對酵母活細胞染色時,由於細胞的新陳代謝作用,細胞內具有較強的還原能力,能使美藍由藍色的氧化型變為無色的還原型,而對代謝作用微弱或死細胞,無此還原能力或還原能力極弱,而被美藍染成藍色或淡藍色。因此,不僅用此法可觀察酵母細胞形態,也可用來鑒別酵母菌的死細胞和活細胞。
二、試劑與器材
1、材料 釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)或卡爾酵母(Saccharomyces calsbergensis)培養2天左右的麥芽汁(或豆芽汁)液體培養物。
2、試劑 0.05%和O.1%呂氏堿性美藍染色液、革蘭氏染色用的碘液。
3、器材 顯微鏡、載玻片、蓋玻片、接種環、灑精燈等。
三、實驗內容
1、美藍浸片觀察 酵母培養→製片→染色→鏡檢→30分鍾後再鏡檢
2、水-碘浸片觀察
四、關鍵步驟及注意事項
1、染液不宜過多或過少,否則,在蓋上蓋玻片時,菌液溢出或出現大量氣泡。
2、用鑷子取一塊蓋玻片,先將一側與菌液接觸,然後慢慢將蓋玻片放下,使其蓋在菌液上,蓋玻片不宜平著放下,避免氣泡產生。
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