一、實驗原理
微生物個體微小、代謝旺盛、生長繁殖快,如果保存不妥容易發生變異和雜菌汙染,甚至導致細胞死亡等現象。因此,保存好菌種是非常必要和重要的。常用的菌種保藏方法包括傳代培養法、載體法、懸液法、冷凍法和真空幹燥法
二、試劑與器材
1、材料 大腸杆菌、青黴菌、放線菌
2、試劑 液體石蠟、甘油、五氧化二磷、95%乙醇、10%鹽酸、無水氯化鈣、食鹽、幹冰
3、器材 無菌吸管、無菌滴管、無菌培養皿;安額管、凍幹管、40目與100目篩子、油紙、濾紙條(0.5X1、2cm)、幹燥器、真泵器、真空泵、真空壓力表、噴燈、L形五通管、冰箱、低溫冰箱(—30℃)、超低溫冰箱和液氮罐等。
三、實驗內容
1、斜麵保藏法
2、液體石蠟法
3、穿刺保藏法
4、砂土管保藏法
5、冷凍真空幹燥保存法
四、關鍵步驟及注意事項
1、清楚各種保藏方法的優缺點,針對不同要求選擇適宜的保藏方法。
2、熔封安瓶時防止封閉不嚴。
3、液氮凍存操作應防止凍傷。
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