常用試劑及其使用方法
一、診斷用紙片
⑴ 杆菌肽紙片(0.04U/片): 抑菌圈>10mm為敏感。質控菌株: D群鏈球菌陰性, A群鏈球菌陽性。
⑵ SMZ紙片(1.25μg/片、23.75μg/片): 出現抑菌圈即為敏感。質控菌株:D群鏈球菌陽性, A群鏈球菌陰性。
⑶ 新生黴素紙片(5.0μg/片): 抑菌圈≥16mm為敏感。質控菌株:表皮葡萄球菌陽性,腐生葡萄球菌陰性。
⑷ O129紙片、奧普托欣(Optochin)紙片:參見《生化試驗培養基》。
二、診斷用血清
1.沙門菌屬診斷血清
⑴ A-F群O多價診斷血清。
⑵ 特異O群因子診斷血清:常用的有O2,O4,O7,O9,O10診斷血清。
⑶ 特異H因子診斷血清 常用的有Ha,Hb,Hc,Hd,Hgm,Hi,Hf、Vi因子診斷血清。
2.誌賀菌屬診斷血清
誌賀菌屬4種多價血清:痢疾誌賀菌Ⅰ、Ⅱ血清,福氏誌賀菌多價血清及分型血清(1~6型),宋內誌賀菌診斷血清,鮑氏誌賀菌多價血清及分型血清。
3.致病性大腸埃希菌診斷血清
腸致病性大腸埃希菌(EPEC)診斷血清,產腸毒素大腸埃希菌(ETEC)診斷血清,腸侵襲性大腸埃希菌(EIEC)診斷血清,腸出血性大腸埃希菌(EHEC)診斷血清O157: H 7。
4.霍亂弧菌O1、O139混合多價診斷血清及稻葉、小川、彥島O139分型血清
5.腦膜炎奈瑟菌多價血清及分群血清
6.鏈球菌分類診斷血清
7.肺炎鏈球菌診斷血清
8.耶爾森菌診斷血清
三、常用染色液
1.革蘭染色液
⑴ 結晶紫溶液 A液:結晶紫 20g,95%乙醇20 ml; B液:草酸銨 0.8g, 蒸餾水80 ml。
染色前24h將A液、 B液混合,過濾後裝入試劑瓶內備用。
⑵ 碘液:碘1g,碘化鉀2g,蒸餾水300ml。
將碘與碘化鉀混合並研磨,加入幾毫升蒸餾水, 使其逐漸溶解,然後研磨,繼續加入少量蒸餾水至碘、碘化鉀完全溶解。最後補足水量。也可用少量蒸餾水將碘化鉀完全溶解,再加入碘片,待完全溶解後,加水至300ml。
⑶ 脫色液:95%乙醇
⑷ 複染液:沙黃2.5g,95%乙醇100ml為貯存液,取貯存液10ml,加蒸餾水90ml為應用液。
2.抗酸染色液
⑴ 堿性複紅染色液: ①萋納石炭酸複紅溶液:堿性複紅乙醇飽和溶液10ml,5%石炭酸溶液90ml。 ②脫色液:濃鹽酸3ml,95%乙醇97ml。③複染液(呂弗勒美藍液):美藍乙醇飽和溶液30ml,100g/L氫氧化鉀溶液0.1ml,蒸餾水100ml。
⑵ 金胺O-羅丹明B染色液: ①羅丹明B液:羅丹明B 0.1g加蒸餾水100ml。②1g/L金胺O液:金胺O液0.1g加蒸餾水95ml,再加入純石炭酸 5ml,混勻。③3%鹽酸乙醇。④稀釋美藍液:呂弗勒美藍液100ml,加蒸餾水90ml,混勻。
3.鞭毛染色液(改良Ryu法)
A液:5%石炭酸10ml,鞣酸2g,飽和硫酸鋁鉀溶液 10ml; B液:結晶紫乙醇飽和液。應用液A液10份,B液1份,混合,室溫存放備用。
4.異染顆粒染色液
甲液:甲苯胺藍 0.15g,孔雀綠 2g/L, 95% 乙醇2.0ml,蒸餾水100ml。乙液:碘 2g,碘化鉀3g,蒸餾水300ml。
先將碘化鉀加入少許蒸餾水(約2ml),充分振搖,待完全溶解,再加入碘,使完全溶解後, 加蒸餾水至300ml。
5.莢膜染色液
⑴ 印度墨汁或50g/L黑色素水溶液
⑵ 5g/L苯胺藍水溶液
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