2.結果與分析
基本培養基對腋芽萌發的影響
外植體Ⅳ置於如表2 所示的培養基上培養,腋芽都能萌發生長,2 種外植體芽的平均萌動率大小及萌動時間的早晚順序是E4 、E2、E3 、El 。在E4 培養基上的外植體節間較長,展葉最快,小苗健壯;E2 、E3 培養基誘導的小苗莖段粗壯,節間短,葉片較厚;在El 培養基上誘導的小苗節間短,生長較緩慢,基部生長無葉柄的葉片較多。
2.2 不同激素組合對腋芽萌動及生長的影響
以2008 年5 月的外植體Ⅳ 接種在表3 所示的培養基上培養,腋芽萌動快慢和萌動率大小最佳是E4 、E8 培養基。
2.3 不同葉位的外植體芽萌發生長的差異性
外植體I 、Ⅱ 、Ⅲ 、Ⅳ 、V 分別置於E4 培養基上培養(表4 )。5 種外植體褐化率大小順序是I 、Ⅱ 、Ⅲ 、Ⅳ 、V ,外植體Ⅲ 萌動最快,外植體I 萌動最晚。外植體Ⅲ 、Ⅳ 萌動天數短,萌動率較高。
2.4 不同季節材料腋芽萌動的差異性將2008 年5 、8 、10 月取材的外植體Ⅳ 分別置於E4 培養基上培養,從表5 可看出,外植體萌動率及萌動快慢均為5 月>8 月>10 月,但汙染率8 月份最高,其次是5 月、10 月。
2.5 不同培養基對試管苗增殖的影響
將試管苗外植體Ml 、MZ 、M3 分別接至E12 、E13 、E14 培養基上培養(表6 ) , 40d 後外植體MI 都未誘導出愈傷組織。在E12 、E13 培養基上培養的外植體MZ ,其莖段基部都形成了愈傷組織,培養20d 左右,外植體上的腋芽都處於萌動狀態,隨後生長旺盛;而在E14 培養基上培養的外植體未誘導出愈傷組織,腋芽萌動比E12 、E13 慢。在E12 、E13 培養基上培養的外植體M3 ,其莖段切口處都形成愈傷組織,頂芽生長,但頂芽下的腋芽未見萌發生長;在E15 培養基上的外植體未能誘導出愈傷組織,頂芽雖能生長,但長勢弱。
2.6 小苗生根培養對移栽成活的影響
試管苗置於E15 培養基上培養10 一15d 後,移栽於蛙石中,在25 一30 ℃ 氣溫條件下半月左右即可發根,然後栽植土壤中,基本可以成活。
3 討論
在B5 、MS 、MT 和改良White 4 種培養基的對比試驗中,MT 培養基培養的外植體,腋芽萌發率最高,萌發速度最快,可能是MT 培養基的的無機成分、維生素等的組合較適合冬青苦丁茶生長。
在許多植物組織培養中,外植體本身的生理狀況、休眠深度與植株再生相關。研究發現,5 月份取材的外植體腋芽萌動最快,萌動率最高;10 月份取材的外植體腋芽萌動最慢,萌動率最低;8 月份取材的外植體的腋芽萌動時間、萌動率介於5 月和10 月份之間,但汙染率高。苦丁茶樹係高大喬木,有很強的頂端優勢。外植體隨著木質化程度的增加,褐變率降低,萌動時間縮短,萌動率提高,但已形成駐芽的外植體芽萌動時間延長。研究中以頂芽下4 一6 葉位的外植體萌動時間最短,萌動率最高,這可能與苦丁茶樹生長特性有關。因此筆者認為,苦丁冬青的莖段培養宜在春季取半木質化的材料作為外植體培養。
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