病毒缺乏完整的酶係統, 而且又無核糖體等細胞器,因此不能在任何無生命的培養液內生長。因此,實驗動物、雞胚以及體 外培養的器官和細胞就成為人工增殖病毒的基本工具。而大量病毒的培養,又是病毒學實驗 研究以及製備疫苗和特異性診斷製劑的先決條件。培養病毒最早應用的方法是實驗動物和 雞胚,但從50年代簡便適用的細胞培養廣泛應用於病毒培養以來,前兩種方法已降到次要地位 ,但至今仍有部分病毒的分離鑒定還離不開實驗動物或雞胚,特別是在免疫血清製備以及病毒 致病性、免疫性、發病機理和藥物效檢等方麵。在禽類病毒病和流感、副流感類等病毒病的 研究方麵,雞胚(含其它禽胚)仍具有重要的應用價值。
一、實驗動物
實驗動物是長期以來分離和增殖病毒、製造病毒抗原和病毒疫苗以及病毒病實驗 研究的常用材料和工具。但是後來發現,實驗動物經常自身帶有病毒,常常混淆試驗結果,並 給病毒疫苗的生產帶來嚴重的潛在危險,例如被某些致瘤病毒所汙染等等。為了克服這個缺 陷,目前已通過微生物控製手段,培育出無菌動物(Germ Free Animal, 簡稱GF)、已知菌動物 或稱 悉生動物(Gnotobiotics, 簡稱GN)和無特定病原動物(Specific Pathogen Free Animal,簡 稱SPF)。GF動物體內和體外均檢不出任何微生物、寄生蟲或其它生命體。GN是確知所帶微生 物的動物。隻帶一種菌的叫單菌動物,其次為雙菌和三菌動物,四菌以上則稱多菌動物。SPF 是指體內無特定微生物和寄生蟲感染的動物。從微生物控製的程度講,SPF動物雖是這三類中 最低的,但它無人畜共患病,無主要傳染病,無對實驗研究產生幹擾的微生物,所以能滿足病毒 學一般實驗的需要,比應用普通實驗動物取得的結果更為科學與可靠。限於條件,某些實驗室 當前仍常應用普通實驗動物,但也必須健康,並使用純係品種。一次實驗使用的動物,在年齡 、體重和營養狀態等方麵要盡量一致。
國外實驗動物科學發展迅速,我國已在部分大城市 建立實驗動物中心,專供應各種經過人工遺傳控製和微生物控製而育成的純係高品位實驗動 物 。為了滿足生物學、醫學和獸醫學研究的需要,國外按遺傳控製標準已育成各類實驗動物260 0餘種,其中小鼠就有1700餘個品係,而且已經規範化、標準化,從而保證了研究工作的科學性 和嚴密性。雖然病毒學實驗中應用實驗動物的比重正在逐步降低,但是乳鼠至今仍是分離 某些蟲媒披膜病毒、柯薩奇病毒和呼腸孤病毒的主要工具。獸醫學上除常應用家兔、小白鼠 、大白鼠、豚鼠、倉鼠和雞胚等進行病毒分離、馴化以及疫苗生產以外,還常直接應用自然 易感動物,例如羊、豬、狗、雞甚至馬和牛等大動物作各該病毒的實驗研究。但如上述,普 通實驗動物經常自身帶毒,甚至發生病毒病的流行。例如家兔常有乳頭狀瘤、多型瘤、皰疹 、兔痘、腦脊髓炎和傳染性口腔炎等病毒感染,小白鼠常有鼠痘(脫腳病)、淋巴細胞性脈絡 叢腦膜炎、病毒性肺炎、腦脊髓炎、白血病、乳腺瘤、鼠肝炎等病毒感染,倉鼠有唾腺炎等 病毒感染,豚鼠有腦膜炎、唾腺炎等病毒感染,實驗研究時必須注意。
實驗動物主要用於:
( 1)分離病毒,並借助感染範圍試驗鑒定病毒;
(2)培養病毒,製造抗原和疫苗;
(3)測定各毒株之 間的抗原關係,例如應用實驗動物作中和試驗和交叉保護試驗;
(4)製備免疫血清和單克隆抗 體;
(5)作病毒感染的實驗研究,包括病毒毒力測定,建立病毒病動物模型等。進行動物實 驗時,首先考慮的是選擇對目的病毒最敏感的實驗動物品種和品係,以及適宜的接種途徑和劑 量。至於實驗動物的飼養管理、接種和采血、剖檢等具體方法,請參閱微生物學實驗指導或 有關專著。
上一篇：抗病毒感染育種
下一篇：雞胚-病毒的培養
