亞病毒的發現
在七十年代，人們於植物中發現了一類新的致病因子，稱其為類病毒(viroid)。類病毒隻是單鏈共價閉合的RNA分子，沒有蛋白質。隨後在研究動物與人的一類被稱為亞急性海綿樣腦病的中樞神經係統疾病，如羊的癢疫(Scrapie)時，發現其病原體與病毒和類病毒完全不同，是一種完全是或主要是由蛋白質組成的大分子，未發現有與感染性直接有關的核酸的存在，故稱蛋白侵染子(prion)或“朊”病毒(virion)。因為類病毒和“朊”病毒沒有一般病毒“由核酸(RNA或DNA)與結構蛋白組成一定形態的病毒粒子”的模式，因此被稱為亞病毒(subviruses)。亞病毒的發現，對病原學研究有著重大意義，有可能對生命的本質和起源以及遺傳機理等生物學基本問題提供嶄新的補充知識，甚至可能衝擊這些領域中現有的某些經典理論。
分子病毒學的誕生與發展
如果說，1953年Watson和Crick闡明DNA的雙螺旋結構，開創了分子生物學時代，那麽，1955年證明煙草花葉病毒和隨後的另一些病毒不僅可在適當條件下裂解為蛋白質和核酸，而且這兩個組成成分還可重新建成感染性病毒粒子，1956年又進一步發現煙草花葉病毒和其他一些病毒的遊離核酸本身就可以引起感染乃至導致典型疾病，則使病毒研究進入分子病毒學階段。近20～30年內先後闡明了DNA和RNA病毒的增殖過程以及某些病毒基因的結構與其表達調控機理。許多病毒基因組的核苷酸序列已經全部或部分測知。病毒基因的克隆、修飾、測序乃至人工合成，已是分子病毒學實驗室的常規技術。近年應用激光光譜儀，特別是X光衍射技術，測定病毒衣殼蛋白和一些病毒酶類的三級結構，取得了明顯進展，不僅闡明了病毒與細胞受體以及病毒與抗體之間的結合部位及其微細結構，得以在分子水平上了解病毒感染的詳細機理以及病毒免疫原在病毒粒子表麵的分布、組成與立體構型,而且為抗病毒藥的作用機製提供了確切的依據，也為病毒免疫原的利用、修飾和移植提供了可靠基礎。
診斷病毒學進展
病毒病診斷同樣經曆了一個逐步發展和提高的過程。早先，人們主要根據疾病的症狀和病理變化作出診斷，這對口蹄疫、痘病和流行性感冒等呈現特征性症狀、病變和流行特點的病毒性疾病，尚有一定的可能性，但也經常發生與類似疾病的混淆；而對不顯特殊症狀的其他一些疾病，則根本無法作出正確診斷。20世紀以來，先後建立了實驗動物接種、病毒分離鑒定和顯微鏡檢查(包涵體和痘病毒等大型病毒的病毒粒子——原質小體)等病毒診斷方法，特別是電子顯微鏡技術，常可直接用於某些病毒性感染材料中病毒粒子的檢出，進行快速診斷。免疫學診斷技術，如中和試驗、補體結合試驗、血凝和血凝抑製試驗、凝膠擴散試驗和乳膠凝集試驗等亦相繼建立和推廣應用。40年代初建立免疫熒光技術，50年代發展了同位素標記技術，60年代有了酶標記技術，70年代以後建立酶聯免疫吸附試驗(ELISA)，並出現了許多改良法。特別是單克隆抗體的應用以及特異性病毒抗原製備技術的改進，進一步提高了檢測水平。近年來分子病毒學的發展，使診斷技術不受抗原抗體反應的限製：應用核酸電泳法可從糞便樣品中直接檢出輪狀病毒等的RNA電泳圖型。70年代在基因工程學基礎上發展起來的核酸探針技術，已經廣泛用於病毒實驗診斷。1985年Mullis等人首創聚合酶鏈式反應(PCR)的DNA擴增技術，可使微量的目的基因或DNA片段在短時間內擴增幾百萬倍。PCR的高度敏感性和特異性，使其成為當前病毒學診斷上最受注意的一種新技術。
病毒疫苗研究進展
在病毒疫苗的研製上，由感染組織和隨後以感染雞胚的胚液或組織製備的疫苗，被稱為第一代疫苗；以人工感染的細胞培養物製成的弱毒疫苗或滅活疫苗以及篩選異源或同源自然弱毒株研製的弱毒疫苗，屬第二代疫苗；采用生物化學或DNA重組技術製備的亞單位疫苗、合成寡肽疫苗以及基因工程疫苗，則是第三代疫苗。基因工程疫苗包括：(1) 通過生物重組技術將野生毒株的表麵抗原基因與弱毒株的其他基因組合構建減毒活疫苗株；這一技術途徑適用於分節段基因組病毒，如流感病毒、輪狀病毒和呼腸孤病毒等；(2) 將病毒的保護性抗原基因插入表達質粒，隨後轉化大腸杆菌或真核細胞等，再收集由其表達和產生的病毒蛋白作為免疫原；(3) 將保護性抗原基因插入痘病毒、腺病毒和皰疹病毒等DNA的非必需區，構建重組活載體疫苗；(4) 在DNA或cDNA水平上造成毒力有關基因的缺失，例如通過缺失突變等手段置換或使病毒株喪失某個毒力基因而降低病毒毒力的基因缺失活疫苗等等。縱觀動物病毒學的發展史，尤其是近年來的進展，我們堅信：我們在這一領域內逐步由必然王國走向自由王國，並且必將有效提高動物疫病的防製水平，保障畜牧業和養殖業的發展以及人畜健康。
上一篇：動物病毒學發展簡史-1
下一篇：病毒的本質
