組織培養配方研製
組織培養配方設計
組織培養配方的研製是組培技術的關鍵,但受材料,經驗等因素的影響,實際生產中配方研究的方法千差萬別,但總體來說還是有章可循的,簡單介紹一些常用方法,以供參考。1、配方的研製方向
1、去分化----誘導形成原球莖、愈傷組織、
2、再分化芽----原球莖形成植株、不定芽形成植株、胚狀體、珠莖、花芽、葉、鱗片母體組織直接產生小植株、無菌短枝扡插腋芽萌發
3、芽苗伸長---小苗拔高,成為幼苗。
4、再分化根--- 愈傷、莖部直接生根
激素一般配比規律Skoog和Miller等所提出的生長素和激動素比例決定根和芽分化的觀點,曾被大量的試驗結果所證明 。因此二者的濃度和比例非常重要,其合適的配比就是常說的配方。狹義的配方,如:MS +BA2+NAA0。2廣義的配方,如:B5 +BA2+NAA0.2+糖5g+活性碳10%+200C+瓊脂6g
1、去分化:生長素低;細胞分裂素高
2、再分化:細胞分裂素高;生長素低
3、莖伸長:赤黴素調節
4、生根:生長素高;細胞分裂素低
1.參閱外來配方:簡單實用,節省時間,較為準確,效益突出。2.原配方的改造:如蘋果棗組培快繁
原分化培養基:MS+6-BA4.0+NAA0.3
篩選分化培養基進行試驗:以原配方BA4.0、NAA0.3為參照,設計4次重複,兩兩組合,則有16種配方組合,從中篩選BA、NAA最佳組合。
6-BA----2.0、3.0、4.0、6.0 mg/L
NAA-----0.05、0.1、0.3、0.5 mg/L
3.新配方的研製3.1完全設計(適合因素少,水平少的試驗)正交設計
正交試驗設計法----它是以概率它是以概率論數理統計論數理統計、專業技術知識和實踐經驗為基礎,充分利用標準化的正交表來安排試驗方案,並對試驗結果進行計算分析,最終達到減少試驗次數,縮短試驗周期,迅速找到優化方案的一種科學計算方法。
我國從我國從20世紀世紀50年代開始,以中國科學院數學研究所為基礎深入研究這門科學,並應用到工農業生產中去,得到了廣泛推廣成績顯著。正交法之所以受到人們的關注正交法之所以受到人們的關注。
正交法應用中幾個常用名詞
指標---在試驗中需要考查的效果的特性值,與試驗目相對應。例如 目的是提高產量,產量就是考查的指標;目的是降低成本,成本就成了考查的指標.指標一般分為定量指標和定性指標,通常把通常把定性指標通過評分定級等方法轉化為定量指標。
因素---試驗中考查對試驗指標可能有影響的原因或要素。通常用大寫英文字母表示等來表示。一個字母表示一個因素。
水平----試驗中選定的因素所處的狀態和條件稱為水平或位級。
用正交法安排試驗方案可以解決以下問題:一是:可以節省大量人力、物力、財力和時間。
二是:能夠各因素的主次順序,即了解哪些因素重要,哪些因素次要。
三是:可以迅速找到優化方案,大大縮短產品開發周期;盡快使生產工藝按最佳工藝條件運行,早日實現高效益。
四是:通過試驗結果分析,可以進一步指明試驗的方向,克服盲目性克服盲目性,
可以歸納出正交實驗的步驟:第一步:明確試驗目的確定考查指標;
第二步:確定因素、選取水平、製定因素水平表;
第三步:選用合適的正交表進行表頭設計;
第四步:確定試驗方案,做正交試驗,記錄試驗結果;
第五步:計算分析試驗結果,選取優化方案;
第六步:驗證試驗,確定最佳方案。
3.4均勻設計是從均勻出發的設計,隻考慮試驗點的均勻分散性,讓各點均衡地分布在試驗範圍內,使每個試驗點有充分的代表性,水平多了,試驗次數少了,在許多行業中取得了顯著效果。
參閱:方開泰1994年著:《均勻設計與均勻設計表》.3.4簡單對比
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