母液和培養基的配製
在實驗中常用的培養基，可將其中的各種成分配成10倍、100倍的母液，放入冰箱中保存，用時可按比例稀釋。配製母液有2點好處：一是可減少每次配製稱量藥品的麻煩，二是減少極微量藥品在每次稱量時造成的誤差。母液可以配單一化合物母液，但一般都配成以下四種不同混合母液。應注意以下幾個方麵：A.藥品稱量應準確，尤其微量元素化合物應精確到0.0001克，大量元素可精確到0.01克。B.配製母液的濃度適當，一是長時間保存後易沉澱，二是濃度大，用量少，在配製培養基時易影響精確度。C.母液貯藏不宜過長，一般幾個月左右，要定期檢查，如出現渾濁、沉澱及黴菌等現象，就不能使用。D.母液應放在2－4℃的冰箱中保存。
(1)大量元素混合母液:指濃度大於0.5mmol／L的元素,即含N、P、K、Ca、Mg、S等六種鹽類的 混合溶液，可配成10倍母液，用時每配1000ml取100ml母液，配時要注意以下幾點：a.各化合物必須充分溶解後才能混合。b.混合時注意先後順序，特別要將鈣離子與硫酸根離子，磷酸根離子錯開，以免產生硫酸鈣、磷酸鈣等不溶性化合物沉澱。c.混合時要慢，邊攪拌邊混合。
(2)微量元素混合母液:指小於0.5mmol／L的元素即含除Fe以外的B、Mn、Cu、Zn、Mo、Cl等鹽類的混合溶液，因含量低，一般配成100倍甚至1000倍，用時每配1000ml取10ml或1ml。配時也要注意順次溶解後再混合，以免沉澱。
(3)鐵鹽母液:鐵鹽必須單獨配製，若同其他無機元素混合配成母液，易造成沉澱。配法是將5.57g FeSO4.7H2O水溶液緩慢加入到7.45gNa2－EDTA微沸水溶液中，並不斷攪拌，最後定容到1000ml，用時每配1000ml培養基取5ml。
（4）有機化合物母液：主要是維生素和氨基酸類物質，這些物質不能配成混合母液，一定要分別配成單獨的母液，其濃度有每ml含0.1、1.0、10mg化合物，用時根據所需濃度適當取用。
（5）植物激素：每種激素必須單獨配製成母液，濃度為每ml含0.1、0.5、1.0mg激素，激素濃度的表示方法有兩種，一種是ppm（或每升中mg數），另一種是mol.用時根據需要取用。由於多數激素難溶於水，它們的配法如下：
1） IAA IBA GA3先溶與少量95%酒精，再加水定容到一定濃度。
2） NAA可溶於熱水或少量95％的酒精中，再加水定溶到一定濃度。
3） 2，4－D不溶於水，可用1mol的NaOH溶解後，再加水定容至一定濃度。
4） KIN和BA先溶於少量1mol的HCl中，再加水定容。
5） 玉米素先溶於少量95％酒精中，再加水至一定濃度。
2培養基的配置
（1）混合培養基中的各成分。先量取大量元素母液，再依次加入微量元素母液、鐵鹽母液、有機成分，然後加入植物激素及其他附加成分。
（2）溶化瓊脂。稱取應加的瓊脂和蔗糖，將瓊脂浸泡到透明後，用蒸餾水加熱燒開熔化瓊脂，待瓊脂完全溶化後，把1加入，用pH試紙測pH值，並用0.1mol的NaOH或HCl調pH為5.6-5.8，最後加水定容至所需體積。
（3）分裝。將熬好的培養基分裝於培養瓶中，分裝時注意不要把培養基倒在瓶口上，以防引起汙染，然後用封口膜或瓶蓋封口。
（4）滅菌。由於培養基內有豐富的營養物質，極利細菌和真菌繁殖，造成汙染，影響組培的成功，一般有高溫高壓消毒和過濾消毒兩種方法。⒈高溫高壓消毒:一般用消毒鍋消毒，注意消毒鍋不能裝的過滿，采用三次放氣滅菌法，即0.05Mpa下放三次氣，在0.1Mpa維持15-20分鍾。⒉過濾消毒：一些易受高溫破壞的培養基成分如IAA、IBA、ZT等，不宜用高溫高壓法消毒，可用過濾消毒，可過濾消毒後再加入已高溫高壓消毒的培養基中，過濾消毒應在無菌室或超淨工件台上進行，以避免汙染培養基。
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