一、基本原理
培養基製成後的物理狀態可分為液體、固體、半固體三種類型。目前所用培養基均為已配製好的生物試劑和紙片。
二、器材
三角瓶、試管、燒杯、玻棒、天平、搪瓷杯、量筒、鋁箔紙、角匙、杜氏小管、矽膠塞、電爐
三、培養基的種類
營養瓊脂培養基、乳糖膽鹽發酵培養基、乳糖發酵培養基、伊紅美蘭瓊脂培養基、馬鈴薯-葡萄糖瓊脂培養基(附加抗菌素)、平板計數瓊脂、月桂基硫酸鹽胰蛋白凍肉湯、煌綠乳糖膽鹽肉湯、EC肉湯、高鹽察氏瓊脂、三糖鐵瓊脂等
四、方法步驟
1、培養基的製備:
(1)稱量:根據培養基的配方,稱取適量藥品於搪瓷杯中;
(2)溶解:用量筒量取所需水量,置電爐上加熱,一邊攪拌,至完全溶解,加熱至沸騰,拔掉電源,待冷卻;
(3)分裝:根據不同需要,立即趁熱分裝入三角瓶或試管中,分裝三角瓶以不超過三角瓶一半為宜,分裝試管一般為管長的1/5(需根據試管的大小而定)。液體培養基如乳糖膽鹽發酵培養基約分裝10毫升左右。
(4)塞矽膠塞:裝好培養基的試管應塞上矽膠塞,鬆緊合適,緊貼管壁,不留縫隙,約1/2塞入內,這樣即可過濾空氣,避免雜菌侵入,又可減緩培養基水分的蒸發。
(5)包裝:三角瓶棉塞頭部應用錫箔紙包紮,試管集中於試管簍。
2、無菌水的製備:
(1)用10ml移液管量取9.2ml蒸餾水(稀釋水)裝入試管中。
(2)用100ml量筒量取95ml蒸餾水(稀釋水)裝入150ml的三角瓶中。可置少許玻璃珠於三角瓶內,防止暴沸。
(3)量取240ml蒸餾水(稀釋水)於250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮紙包紮好,高壓滅菌備用。
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