2 材料和方法
2.1材料
2.1.1菌株來源
嗜酸乳杆菌 （Lactobacillus acidophilus），代號為ATCC4356；La-IM1、La-IM2 和La-IM3 分離自內蒙古傳統發酵乳製品。
2.1.2儀器設備
紫外分光光度計、光學顯微鏡 （OLMPUS ）、梅特勒—托利多Delta320pH 計、電熱手提式壓力蒸汽滅菌器、恒溫培養箱、超淨工作台等。
2.1.3培養基
RS培養基[9]:5g/L酵母提取物，10g/L蛋白腖，10g/L牛肉膏，20g/L葡萄糖，2g/L K HPO ，2g/L檸檬酸二銨，5g/L 乙酸鈉，0.58g/L MgSO .7H2O ，0.25g/L MnSO .4H2O, 調pH6.2～6.4，固體需加15g/L瓊脂粉，121℃滅菌15min。
2.2方法
2.2.1菌種的活化與分純
用接種環挑取少量冷凍幹燥保藏的菌粉，接種於液體MRS 培養基中37℃，24h培養，連續傳代兩次進行活化；將活化後的菌種於MRS 固體培養基上劃線培養，37℃，48h 培養；挑取半個單菌落染色鏡檢，如果鏡檢未發現雜菌，則用接種環挑取另外半個單菌落接種於液體MRS 培養基中培養並保存備用；如果鏡檢發現雜菌，則用接種環挑取單菌落於MRS 固體培養基上劃線培養，再鏡檢，直至分純。
2.2.2 4株菌酸耐受性的實驗
將4 株嗜酸乳杆菌以3% 的接種量接種於MRS 液體培養基中進行傳代一次。用鹽酸調節MRS 液體培養基的pH 值為2.5，吸取4.5mL 於4 個試管中，置於高壓滅菌鍋內進行121℃、15min滅菌。按照 10%的添加量吸取500 μL菌液分別加入到4個試管中作用3h。作用結束後，將試管在漩渦混勻器上進行震蕩混勻，平板塗布進行活菌計數。
2.2.3嗜酸乳杆菌La-IM2生長曲線的測定
將嗜酸乳杆菌La-IM2 按3％的接種量，接種到裝有300mL液體培養基的錐形瓶中，37℃進行培養。每隔2h在無菌超靜工作台中取出20mL 用於測OD600 和pH 值，直至24h，然後繪製生長曲線。
2.2.4嗜酸乳杆菌La-IM2在不同pH值條件下的酸耐受性實驗
用鹽酸調節PBS緩衝液的pH值分別為 1.5、2.5、3.5、4.5、7，然後將嗜酸乳杆菌La-IM2 按 10％的接種量接種於以上pH 值的PBS 緩衝液中，在37℃下進行作用，作用時間分別為1.5h和3h，隨後將試管在漩渦混勻器上進行震蕩混勻，平板塗布進行活菌計數。
2.2.5活菌計數方法
每個樣品取3 個平行，用PBS 緩衝液 （pH 7）逐步稀釋5個梯度。以MRS 固體培養基為計數培養基，於37℃培養48～72h後平板計數[10]，選擇平板上菌落數在30～300個菌落的平板，統計菌落數，最後求取平均值。
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