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食品衛生微生物學檢驗小腸結腸炎耶爾森氏菌檢驗——GB



錄入時間:2009-1-9 16:16:50 來源:青島betway必威西汉姆联生物

1.範圍
本標準規定了小腸結腸炎耶爾森氏菌的檢驗方法。
本標準適用於各類食品及食物中毒樣品中小腸結腸炎耶爾森氏菌的檢驗。
2.規範性引用文件
下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件,其隨後所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修汀版均不適用於本標準,然而,鼓勵根據本標準達成協議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用於本標準。GB/T4789.1食品衛生微生物學檢驗總則
3.設備和材料
3.1冰箱:0℃~4℃。
3.2恒溫培養箱:36℃士1℃、4℃士1℃、26℃士1℃。
3.3顯微鏡:10*——100*。
3.4均質器或滅菌乳缽。
3.5架盤藥物天平:0g——500g,精確至0.59。
3.6滅菌試管:16mm*160mm、15mm*100mm。
3.7滅菌吸管:1mL(具O.0lmL刻度)、5mL、10mL(具O.lmL刻度)。
3.8滅菌錐形瓶:500mL、200mL。
3.9滅菌培養皿:直徑90mm。
3.10 0.5mL注射器。
3.11滅菌刀、剪子、鑷子等。
3.12小白鼠:12g——15g。
4.培養基和試劑
4.1改良磷酸鹽緩衝液PSB:按GB/T4789.28一2003中4.46規定。
4.2CIN一I培養慕:按GB/T4789.28一2003中4.4了規定。
4.3改良Y培養基,按GB/T478928一2003中4,48規定。
4.4改良克氏雙糖:按GB/T4789.28一2003中4.49規定。
4.5山梨醇、鼠李糖、蔗糖、甘露醇等發酵管:按GB/T4789.28一2003中3.2規定.
4.6鳥氨酸脫浚酶肉湯:按GB/T4789.28一2003中3.12規定.
4.7半固體瓊脂:按GB/T4789.28一2003中4.30規定。
4.8V-P試劑:按GB/T4789.28一2003中3.4規定。
4.9無菌礦物油.
4.10堿處理液:0.5%級化物——0.5%氫氧化鉀混合液。
4.11尿素培養基:GB/T 4789.28一2034.38規定。
5.檢程:腸結腸炎爾氏菌檢驗程序見圖(略)
6.作驟
6.1樣品的采集和處理:見GB/T 4789.1,樣品采集應快送檢。
6.2增菌培:食樣品與改良的磷酸鹽緩衝液增菌液以1 ,1的比例棍合,置4℃ 冰箱進行冷增菌.
6.3堿處:肉及其製品的冷增菌液0.5mL與堿處理4.5mL混合15s.
6.4離培養:將冷增菌和處的冷增菌液分接CIN-1和改良Y培養基,於26℃ 48h培養後,在CIN-1上挑取紅色牛眼狀菌落,在改良Y上挑取色透明、不粘稠的菌落,進行進一步的鑒定。
6.5改良克氏雙糖試驗:將上述可疑菌落接種改良克氏雙糖管,於26℃ 24h培養,將斜麵和底部皆變黃者做進一步的生化鑒定。
6.6尿素酶試驗和力觀察:將改良克氏雙糖上的可疑培養物接種到尿素培養基上,注意接種量要大,挑取一接種環,振搖幾秒鍾,放置於ZG℃ 培養Zh一4h然後將陽性者接種兩管半固體,分別放置26℃ 和37℃ 恒溫養箱中,養艦h檢查,如在26℃ 有動力者可進行檢和進一步的生化試驗。
6.7染色鏡檢將述可疑菌落做塗片染色,進行顯微鏡觀察,呈革蘭氏陰性球杆菌,有時呈橢圓或杆狀,大小為(0.8——3.0um)*0.8um者做下化試驗。
6.8生化特性將述可疑的菌落做進一步的生化試驗。所有的生化反應皆在26℃ 培養。
6.9血清型鑒:進行生化鑒定外,亦可做血清型鑒定。目前國內可生產27種O型血清因子,供各地使用。具體操作方法與沙門氏菌O因子血清分型相同。   
   

 

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