一、基本原理
糖發酵試驗是最常用的生化反應,在腸道細菌的鑒定上尤為重要。絕大多數細菌都能利用糖類作為碳源和能源,但是它們在分解糖的能力上有很大的差異,有些細菌能分解某種糖並產酸(如乳酸、醋酸、丙酸等)和氣體(如氫、甲烷、二氧化碳等);有些細菌隻產酸不產氣。例如大腸杆菌能分解乳糖和葡萄糖產酸並產氣;傷寒杆菌能分解葡萄糖產酸不產氣,不能分解乳糖;普通變形杆菌分解葡萄糖產酸產氣,不能分解乳糖。
酸的產生可利用指示劑來斷定。在配製培養基時預先加入溴甲酚紫[pH5.2(黃色)-6.8(紫色)],當發酵產酸時,可使培養基由紫色變為黃色。氣體的產生可由發酵管中倒置的德漢氏小管中有無氣泡來證明,如圖Ⅹ-4。
二、器材
大腸杆菌,普通變形杆菌( Proteus vulgaris)斜麵各1支;盛有葡萄糖發酵培養基的試管和乳糖發酵培養基的試管各3支(內裝有倒置的德漢氏小管),試管架,接種環等。
三、操作步驟
1、編號
用記號筆在各試管上分別標明發酵培養基名稱和所接種的菌名。
2、接種
取盛有葡萄糖發酵培養基的試管3支,按編號1支接種大腸杆菌,另1支接種普通變形杆菌,第3支不接種,作為對照。另取乳糖發酵培養基試管3支,同樣1支接種大腸杆菌,1支接種普通變形杆菌,第3支不接種,作為對照。
3.將上述已接種的葡萄糖和乳糖發酵試管和對照管置37℃溫室中培養24小時。
4.觀察結果。
四、實驗報告
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