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實驗三十三 化學因素對微生物的影響



錄入時間:2009-1-6 15:06:24 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、基本原理
  常用的化學消毒劑主要有重金屬及其鹽類,酚、醇、醛等有機化合物以及碘、表麵活性劑等。它們的殺菌或抑菌作用主要是使菌體蛋白質變性,或者與酶的—SH基結合而使酶失去活性所致。
  本實驗是觀察某些常用的化學藥品在一定濃度下對微生物的致死或抑菌作用,從而了解它們的殺菌或抑菌性能。
  為了比較各種化學消毒劑的殺菌能力,常以石炭酸為標準,即將某一消毒劑作不同稀釋後,在一定條件下,一定時間內致死全部供試微生物的最高稀釋濃度,與達到同樣效果的石炭酸的最高稀釋度的比值,稱為這種消毒劑對該種微生物的石炭酸係數(酚係數)。石炭酸係數越大,說明該消毒劑殺菌能力越強。
二、器材
  大腸杆菌,白色葡萄球菌(Staphylococcus albus);
  牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基,2.5%碘酒,0.1%升汞(HgCl2),5%石炭酸,75%酒精,1%來蘇爾,0.25%新潔爾滅, 0.005%龍膽紫,0.05%龍膽紫;
  培養皿,濾紙片,試管,吸管等。
三、操作步驟
  1.各種化學藥品的殺菌作用
  (1)用無菌吸管吸取培養18小時的白色葡萄球菌菌液0.2ml於無菌平皿內。
  (2)倒入已溶化並冷至45℃左右的牛肉膏蛋白腖瓊脂培養基於上述平皿內,充分搖勻,水平放置,待凝。
  (3)將上述已凝固的平皿用記號筆在平皿底劃成八等份,每一等份內標明一種藥物的名稱。
  (4)用無菌鑷子將小圓形濾紙片分別浸入各種藥品中,取出,並在試管內壁上除去多餘藥液後,以無菌操作將紙片對號放入培養皿的小區內,如圖Ⅸ-1。
  (5)將上述放好濾紙片的含菌平皿,倒置於37℃溫室中培養24小時後,取出測定抑菌圈大小,並說明其殺菌強弱。
  2.石炭酸係數的測定
  (1)將5%(1:20)的石炭酸液按表Ⅸ-1配成不同濃度,每管5ml。
  (2)將待測藥物(來蘇爾)先配成1:20的原液,再按表Ⅸ-2配成不同濃度,每管 5ml。
   (3)取肉膏蛋白腖液體培養基30管,1—15管標明石炭酸的5種濃度,每種濃度3管,每3管分5、10、15分鍾處理,16—30管標明來蘇爾的5種濃度,同樣每種濃度3管,每3管分5、10、15分鍾處理。
   (4)在上述不同濃度的石炭酸和來蘇爾溶液中,各接入0.5ml大腸杆菌液,搖勻。注意每管自接種時起在5、10、15分鍾,用同一接種環從各管內取一環接入上述已標記的液體培養基試管中。
  (5)置37℃溫室中培養 48小時,觀察並記錄生長情況。生長者溶液混濁,以“+”表示;不生長者溶液澄清,以“-”表示。
  (6)計算係數值 找出在5分鍾生長,而在10分鍾和15分鍾均不生長的石炭酸及來蘇爾的最大稀釋度,計算二者的比值。例如石炭酸在10分鍾內殺死大腸杆菌的最大稀釋度是1:70,來蘇爾是1:250,則來蘇爾的石炭酸係數為250/70=3.6。
四、實驗報告   
   

 

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