6.12 V-P半固體瓊脂(VP)
6.12.1 製備
蛋白腖 12.0g
酵母膏 1.0g
葡萄糖 10.0g
氯化鈉 5.0g
瓊 脂 3.0g
蒸餾水 100.0mL
將各成分加入蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10min,加熱煮沸至完全溶解,調至pH7.3 ±0.1,分裝試管(12mm×100mm),每管1～1.5mL,高壓滅菌121℃,10min,滅菌後立即取出冷卻備用。
6.12.2 試驗判斷
6.12.2.1 配製試劑
甲液：
α-萘酚 6.0g
無水乙醇溶液 100.0mL
乙液：
氫氧化鉀 40.0g
肌 酸 0.3g
蒸餾水 100.0mL
先將氫氧化鉀溶於水中,再加入肌酸。
甲液和乙液保存於4℃冰箱中,可使用2個月,
6.12.2.2 試驗
接種幼嫩待試菌,於37℃培養24±2h,將甲液0.2mL(約6滴)加入試管中,搖混均勻, 再加乙液0.1mL(約3滴),再搖混均勻。
6.12.2.3 判斷
陽性反應立即或在15min內呈現紅色,陰性為銅色。陰性結果在1 h後再做一次檢查。有些試管在數小時後紅色會逐漸消失,此仍作陽性反應。
6.13吲哚培養基(Ⅰ):
6.13.1 製備
蛋白腖 10.0g
氯化鈉 5.0g
DL-色氨酸 1.0g
蒸餾水 1000.0mL
除DL-色氨酸外,將其他成分加入蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10 min。另將DL-色氨酸加入約4mL 1mol/L氫氧化鈉溶液中,待溶解後,再將兩液進行混合並加熱煮沸至完全溶解,調至pH7.4±0.1,分裝試管(12mm×100mm),每管1～1.5mL,高壓滅菌121℃,15min。
6.13.2 試驗與判斷
6.13.2.1 配製試劑
柯凡克試劑：
對二甲氨基苯甲醛 10.0g
戊 醇 150.0mL
濃鹽酸 50.0mL
將色澤鮮明幹燥的對二甲氨基苯甲醛溶於戊醇中,緩慢攪拌加入鹽酸,加熱至60℃, 呈深黃色,靜置6～7h,變成黃色即可使用。試液宜小量配製,不用時保存於4℃冰箱內。久存後試液變成黃褐色不可使用。
6.13.2.2試驗接種待試菌,於37℃培養24±2h,滴加柯凡克試劑0.1mL。
6.13.2.3判斷
陽性反應出現紅色環；陰性為黃棕色環。
上一篇：進出口行業標準-出口食品沙門氏菌屬(包括亞利桑那菌)——5
下一篇：進出口行業標準-出口食品沙門氏菌屬(包括亞利桑那菌)——7
