1、主題內容與適用範圍
本標準規定了海產食品中副溶血性弧菌檢驗方法。
本標準適用於海產食品中副溶血性弧菌檢驗,其他食品可參照使用。
2、設備與材料
2.1 試管:17mm×170mm、15mm×150mm、10mm×100mm。
2.2 吸管:1mL、10mL。
2.3 培養皿:直徑90mm。
2.4 廣口瓶或三角瓶。
2.5 電動均質器。
2.6 電動試管振蕩器。
2.7 37℃恒溫箱。
2.8 42℃恒溫水浴箱。
2.9 試管架。
3、培養基及試劑
3.1 30g/L氯化鈉稀釋液:見9.1。
3.2 60g/L氯化鈉蛋白腖水(PW):見9.2。
3.3 氯化鈉多粘菌素B肉湯(SPB):見9.3。
3.4 硫代硫酸鈉、檸檬酸鈉、膽鹽、蔗糖瓊脂(TCBS):見9.4。
3.5 氯化鈉三糖鐵瓊脂(TSI):見9.5。
3.6 嗜鹽性試驗用胰腖水(TB):見9.6。
3.7 胰腖大豆瓊脂斜麵(TSA):見9.7。
3.8 靛基質試驗用培養基(I):見9.8。
3.9 氨基酸試驗用培養基:見9.9。
3.10 V-P半固體瓊脂(VP):見9.10。
3.11 糖類分解試驗用培養基:見9.11。
3.12 42℃生長試驗用培養基:見9.12。
3.13 O/F試驗用培養基(HLGB):見9.13。
3.14 神奈川現象試驗用我妻氏瓊脂(WA):見9.14。
4 樣品製備
4.1 冷凍樣品應在45℃以下不超過15min或在2～5℃不超過18 h解凍。若不能及時檢驗, 應放於—15℃左右保存；非冷凍而易腐的樣品應盡可能及時檢驗,若不能及時檢驗,應置於6～10℃冰箱保存,在24 h內檢驗。
4.2 取樣:以無菌操作進行。
4.2.1 魚類:取魚體不同部位。
4.2.2 貝類:取內髒或含內髒的全部貝肉；如為帶殼貝類,則應先在清潔的流水中洗刷淨外殼,然後以無菌操作打開貝殼,取出內髒或含內髒的全部貝肉和貝液。
4.2.3 甲殼類:取包括鰓及腸的部分或整體。
4.3 以無菌操作稱取50g檢樣放於均質杯中,以滅菌剪刀充分剪碎。
4.4 加30 g/L氯化鈉稀釋水450mL,均質(8 000 r/min)1min,使成1:10稀釋液(如無均質器,則應以剪刀盡量剪碎,加450mL稀釋水使成1:10稀釋液,並充分振蕩)。
4.5 用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL,注入裝有9mL30 g/L氯化鈉稀釋水的試管內,振搖試管混合均勻,製成1:100稀釋液。
4.6 每一稀釋度換取1支1 mL滅菌吸管,按上項操作順序進行10倍遞增稀釋。稀釋倍數要依據有關標準、規定、要求或樣品汙染情況而定。
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