2結果與討論
2．1大腸杆菌的生長代謝產熱曲線和生長速率常數
在37℃下，采用安瓶法測定了大腸杆菌生長代謝的產熱曲線，同時測定了其分別在頭孢呱酮鈉和頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉作用下生長的產熱曲線，大腸杆菌在這兩種藥物作用下的生長代謝受到抑製，並且呈現出濃度依賴性關係．大腸杆菌在頭孢呱酮鈉作用下的產熱曲線的停滯期更長，生長期的最大產熱功率更小，這說明大腸杆菌對頭孢呱酮鈉更敏感．大腸杆菌在指數生長期內，其細胞數按指數規律增加，產熱曲線符合指數式生長方程：lnPt=lnP0+kt(1)式中，P0和Pt分別代表細胞在對數生長時的初始點和t時刻的產熱功率，k是細胞生長的速率常數．將lnPt對t進行線性回歸，其斜率即為生長速率常數(k)，是相關係數．細菌生長的抑製率定義為，I=[(k0一kc)／k0]X100％(2)式中，k。為細菌在沒有藥物作用時的生長速率常數，k是細菌受到藥物濃度為c時抑製的生長速率常數．半抑製濃度IC50，為抑製率為50％時所對應的藥物濃度．根據以上定義，計算了頭孢呱酮鈉和頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉對大腸杆菌的抑製率．
2．2生長速率常數k與濃度C的關係
由表1可看出，當頭孢呱酮鈉的質量濃度為0．01g／mL時，大腸杆菌的生長速率常數k為1．78，這與大腸杆菌在沒有藥物作用時的k值很接近，其相應的抑製率也較低，說明頭孢呱酮鈉在該濃度下對大腸杆菌的抑製作用很小．隨著頭孢呱酮鈉濃度的增加，k值逐漸減小，這是由於在加入頭孢呱酮鈉後，部分大腸杆菌被殺死或被抑製，其餘的以較低的生長速率繼續進行新陳代謝．用計算機進行擬合，得到k與濃度c的關係為k=一22．40c+1．867，R=-0．9884(3)由式(3)可見，對於頭孢呱酮鈉，k與c存在較好的線性關係．當頭孢呱酮鈉的質量濃度達到0.1g／mL時，大腸杆菌的生長完全被抑製，其半抑製濃度Ic。為0．04g／mL．對於頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉，隨著其濃度的增加，大腸杆菌的k值是先減小後增加(表2)．當頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉的質量濃度為0．05g／mL時，大腸杆菌的生長速率常數k為1．09，抑製率為41．1％；大腸杆菌在相同濃度的頭孢呱酮鈉作用下的k值為0．73，抑製率為60．4％，這從一個方麵說明了頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉對大腸杆菌的抑製作用比頭孢呱酮鈉弱．其k與濃度c的關係可用下式表示：k=130．3c一25．54c+1．896，R0．9633(4)
當頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉的質量濃度達到0．25Ixg／mL時，大腸杆菌的生長完全被抑製，其最小半抑製濃度IC50為0．05g／mL．與頭孢呱酮鈉半抑製濃度相比，加入舒巴坦鈉並沒有增加頭孢呱酮鈉對大腸杆菌DH5a的抑製作用．
2．3Pm與生長速率常數k的關係
隨著頭孢呱酮鈉濃度的增加，大腸杆菌的最大產熱功率P逐漸減小，這與k值逐漸減小相吻合，說明頭孢呱酮鈉對大腸杆菌的抑製作用比較穩定．將頭孢呱酮鈉P對其濃度c進行線性擬合，則可得到P與c的關係為P=一2714c+551．9，R=一0．9849(5)如表2所示，對於頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉，P隨c的變化趨勢與其k值隨c的變化趨勢一致，都是先減小然後再增加．在頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉的質量濃度達0．15g／mL時，P值開始上升，這可能是由於頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉對大腸杆菌的抑製作用是暫時的，在經過相對較長的停滯期後，大腸杆菌又會重新生長，並伴隨著釋放出較高的熱量．頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉P與其濃度的關係可表示為P=374470c（3）一78310c（2）+2438c+542．7，R（2）=0．9999(6)
2．4t與生長速率常數k的關係
由表1可知，隨著頭孢呱酮鈉濃度的增加，大腸杆菌的最大產熱功率P所對應的時間t逐漸增加．在較低質量濃度範圍內(0．1～0．05ug／mL)，t增加趨勢較為平緩；當頭孢呱酮鈉的質量濃度較高(>0．05ug／mL)時，t增加幅度較大t與c的關係為t=(1．182×10（-7）-1．31lc（2）+33188c+2194，R=0．9760(7)對於頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉，隨著其濃度的增加，t也逐漸增加(見表2)，t與c的關係為t=95613e+3758e+2261，R=0．9586(8)
綜上所述，采用微量量熱法測定了頭孢呱酮鈉和頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉在37℃時對大腸杆菌DH5a代謝作用的產熱曲線．結合k，t，P與c的關係發現，頭孢呱酮鈉對大腸杆菌DH5a的抑製作用要比頭孢呱酮鈉舒巴坦鈉強，即舒巴坦鈉的加入並沒有增強頭孢呱酮鈉對大腸杆菌DH5a的抑製作用．同時，實驗結果表明，微量量熱法是一種有效的體外篩選藥物的方法，可指導藥物設計、揭示藥物與微生物間的相互作用機理，並且對指導醫藥在臨床上合理使用抗生素等方麵有重要的應用和理論價值．
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