A7 溶菌酶營養肉湯
牛肉膏 3.0g
蛋白腖 5.0g
蒸餾水 稀釋至1000mL
0.1%溶菌酶溶液 10.0mL pH6.8±0.1
將上述成分(溶菌酶溶液除外)溶解於蒸餾水並稀釋至1000mL。校正pH後,分裝於燒瓶中,每瓶99mL。121℃高壓滅菌15min。於每瓶中加入0.1％溶菌酶溶液1mL,混勻後分裝滅菌試管,每管2.5mL。
注：溶菌酶溶液：在65mL滅菌的0.1mol/L鹽酸中加0.1g溶菌酶。煮沸20min溶解後,再用滅菌的0.1mol/L 鹽酸稀釋至100mL。
A8 改良 V-P培養基
(月示)蛋白腖 7.0g
葡萄糖 5.0g
氯化鈉 5.0g pH6.5±0.1
將上述各成分溶解於蒸餾水並稀釋至1000 mL。校正pH後分裝試管,每管5mL。121℃高壓滅菌10 min備用。
A9 動力培養基
胰酪腖 10.0g
酵母膏 2.5g
葡萄糖 5.0g
磷酸氫二鈉 2.5g
瓊 脂 3.0g
蒸餾水 稀釋至1000mL pH7.4±0.2
將上述各成分於蒸餾水加熱溶解並稀釋至1000 mL。校正pH後,分裝試管,每管2mL。121℃高壓滅菌10 min備用。
A10 胰酪腖大豆羊血瓊脂(TSSB)
胰酪腖 15.0g
植物腖 5.0g
氯化鈉 5.0g
瓊 脂 15.0g
蒸餾水 稀釋至1000mL pH7.0±0.2
將上述各成分於蒸餾水中加熱溶解。校正pH後,分裝燒瓶,每瓶100mL。121℃高壓滅菌15min。水浴中冷至45～50℃加入5mL無菌脫纖維羊血,混勻後傾注平板,每皿18～20mL。
附 錄 B 試 劑 配 製 (補充件)
B1 Butterfield氏磷酸鹽緩衝稀釋液
在500mL蒸餾水中溶解磷酸二氫鉀(KH2PO4) 34.0g,用1mol/L氫氧化鈉溶液約175mL校正pH至7.2,再用蒸餾水稀釋至1000 mL,製成儲存液於冰箱中儲存。取原液1.25mL,用蒸餾水稀釋至1000 mL。分裝試管,每管90 mL,121℃高壓滅菌15 min。
B2 亞硝酸鹽試劑
a. 試劑A：對氨基苯磺酸8.0g,溶解於5mol/L,乙酸1000 mL中。
b. 試劑B：α-萘酚2.5g溶解於5mol/L乙酸1000 mL中。
B3 V-P試劑
a. 5％α-萘酚溶液：取α-萘酚5.0g溶解於100 mL無水乙醇中。
b. 40％氫氧化鉀溶液：將氫氧化鉀40 g於蒸餾水中溶解並稀釋至100 mL。
c. 肌氨酸結晶。
B4 堿性複紅染色液 取堿性複紅0.5g溶解於20mL乙醇中,再用蒸餾水稀釋至100mL,濾紙過濾後儲存備用。
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