中華人民共和國國家標準 生活飲用水標準檢驗方法微生物指標
Standard examination methods for drinking water一Microbiolo隻ical parameters
1、菌落總數
1.1平皿計數法1.1.1範圍本標準規定了用平皿計數法測定生活飲用水及其水源水中的菌落總數本法適用於生活飲用水及其水源水中菌落總數的測定。1.1.2術語和定義下列術語和定義適用於本標準。1.1.2.1菌落總數standard plate - count加cteria水樣在營養瓊脂上有氧條件下37℃ 培養48h後,所得1ml水樣所含菌落的總數
1.1.3培養基與試劑1.1.3.1營養瓊脂1.1.3.1.1成分:A 蛋白陳10gB 牛肉膏3g
C 氯化鈉5gD 瓊脂10g——20gE 蒸餾水1000ml1.3.1.2製法:將上述成分混合後,加熱溶解,調整pH為7.4一7.6,分裝於玻璃容器中(如用含雜質較多的瓊脂時,應先過濾),經103.43 kPa (121℃,15lb)滅菌20 min,儲存於冷暗處備用。
1.1.4儀器1.1.4.1高壓蒸汽滅菌器。1.1.4.2幹熱滅菌箱。1.1.4.3培養箱36℃ 士2℃ 。1.1.4.4電爐。1.1.4.5天平。1.1.4.6冰箱。1.1.4.7放大鏡或菌落計數器。1.1.4.8 pH計或精密pH試紙。1.1.4.9滅菌試管、平皿(直徑9cm)、刻度吸管、采樣瓶等1.1.5檢驗步驟1.1.5.1生活飲用水1.1.5.1.1門以無菌操作方法用滅菌吸管吸取1mL充分混勻的水樣,注人滅菌平皿中,傾注約15mL已融化並冷卻到45℃左右的營養瓊脂培養基,並立即旋搖平皿,使水樣與培養基充分混勻每次檢驗時應做一平行接種,同時另用一個平皿隻傾注營養瓊脂培養基作為空白對照1.1.5.1.2待冷卻凝固後,翻轉平皿,使底麵向上,置於36℃士1℃ 培養箱內培養48h,進行菌落計數,即為水樣1 ml中的菌落總數1.1.5.2水源水1.1.5.2.1以無菌操作方法吸取lml充分混勻的水樣,注入盛有9ml、滅菌生理鹽水的試管中,混勻成1 : 10稀釋液。1.1.5.2.2吸取I : 10的稀釋液工ml注入盛有9mL滅菌生理鹽水的試管中,混勻成l :10稀釋液。按同法依次稀釋成l : 1000 , l : 10000稀釋液等備用。如此遞增稀釋一次,必須更換一支1mL滅菌吸管。1.1.5.2.3用滅菌吸管取未稀釋的水樣和2個——3個適宜稀釋度的水樣1ml,分別注入滅菌平皿內以下操作同生活飲用水的檢驗步驟。1.1.6菌落計數及報告方法 作平皿菌落計數時,可用眼睛直接觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平皿的菌落數後,應求出同稀釋度的平均菌落數,供下一步計算時應用在求同稀釋度的平均數時,若其中一個平皿有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應以無片狀菌落生長的平皿作為該稀釋度的平均菌落數。若片狀菌落不到平皿的一半,而其餘一半中菌落數分布又很均勻,則可將此半皿計數後乘2以代表全皿菌落數。然後再求該稀釋度的平均菌落數。1.1.7不同稀釋度的選擇及報告方法1.1.7.1首先選擇平均菌落數在30一300之間者進行計算,若隻有一個稀釋度的平均菌落數符合此範圍時,則將該菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表1中實例1)1.1.7.2若有兩個稀釋度,其生長的菌落數均在30一300之間,則視二者之比值來決定,若其比值小於2應報告兩者的平均數(如表1中實例2)若大於2則報告其中稀釋度較小的菌落總數(如表l中實例3)若等於2亦報告其中稀釋度較小的菌落數(見表l中實例4)。1.1.7.3若所有稀釋度的平均菌落數均大於300,則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表1中實例5 )1.1.7.4若所有稀釋度的平均菌落數均小於30,則應以按稀釋度最低的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表l中實例6)。1.1.7.5若所有稀釋度的平均菌落數均不在30——300之間,則應以最接近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表1中實例7)。1.1.7.6若所有稀釋度的平板上均無菌落生長,則以未檢出報告之1.1.7.7如果所有平板上都菌落密布,不要用“多不可計”報告,而應在稀釋度最大的平板上,任意數其中2個平板1cm翌中的菌落數,除2求出每平方厘米內平均菌落數.乘以皿底麵積63.6cm2,再乘其稀釋倍數作報告。1.1.7.8菌落計數的報告:菌落數在100以內時按實有數報告,大於100時,采用兩位有效數字,在兩位有效數字後麵的數值,以四舍五人方法計算,為了縮短數字後麵的零數也可用10的指數來表示(見表I“報告方式”欄)
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