一、微生物學檢查
(一)標本
取糞便標本應挑取糞便的膿血或黏液部分,避免與尿液混合。應在使用抗生素之前采樣,標本應新鮮,若不能及時送檢,宜將標本保存於30%甘油緩衝鹽水或專門運送培養基內。中毒性痢疾患者可取肛拭子。
(二)分離培養與鑒定
將標本接種於腸道鑒別或選擇培養基上,37℃孵育18—24h。挑取無色透明可疑菌落做生化反應和血清學試驗,以確定其菌群(種)和菌型。
(三)毒力試驗
測定誌賀菌的侵襲力可用Sennery試驗。係將受試菌18—24h的固體培養物,以生理鹽水製成9億/ml菌懸液,接種於豚鼠眼結膜囊內。若發生角膜結膜炎,則Sennery試驗陽性,表明受試菌有侵襲力。測定誌賀菌的ST,可用Hela細胞或Vero細胞,也可用PCR技術直接檢測其產毒基因stxA、stxB。
(四)快速診斷法
1、免疫染色法將糞便標本與誌賀菌抗血清混勻,在光鏡下觀察有無凝集現象。
2、免疫熒光菌球法:將標本接種於含有熒光素標記的誌賀菌免疫血清液體培養基中,37℃孵育4—8h。若標本中含有相應型別的誌賀菌存在,則生長繁殖後與熒光抗體凝集成小球,在熒光顯微鏡下易被檢出。
3、協同凝集試驗:以誌賀菌lgG抗體與Gowan葡萄球菌結合成為試劑,用來檢測病人糞便中有無誌賀菌可溶性抗原。
4、膠乳凝集試驗用誌賀菌抗血清致敏膠乳,使與糞便中的誌賀菌抗原起凝集反應。也可用誌賀菌抗原致敏膠乳,來檢測糞便中有無誌賀茵抗體。
5、分子生物學方法:用PCR技術、基因探針檢測1.40MDa的大質粒等。
二、防治原則
非特異性防治措施包括:水、食物和牛奶的衛生學監測,垃圾處理和滅蠅;隔離病人和消毒排泄物;檢測發現亞臨床病例和帶菌者,特別是飲食從業人員;抗生素治療感染個體。
誌賀菌的免疫防禦機製主要依靠腸黏膜表麵的slgA,而slgA需由活菌作用於黏膜局部才能誘發。因此,目前致力於活疫苗的研究。主要分為3類,即減毒突變株、用不同載體菌構建的雜交株以及營養缺陷減毒株。例如,鏈黴素依賴株活疫苗是一種減毒突變株;環境中存在有鏈黴素時始能生長繁殖。將其製成活疫苗給誌願者口服後因正常人體內不存在鏈黴素,該sd株不能生長繁殖,但也不立即死亡,尚可有一定程度的侵襲誌願者腸黏膜而激發局部免疫應答,產生slgA。同時,血清中的lgG、lgM特異抗體也增多。sd活疫苗的免疫保護具有特異性。 目前已能生產多價誌賀菌sd活疫苗。多種雜交株活疫苗也在研究之中。如將誌賀氏菌的大質粒導入另一弱毒或無毒菌中,形成二價減毒活疫苗。曾被選為研究對象的有宋內誌賀菌與傷寒沙門菌Ty2ia的雜交疫苗等。
治療誌賀菌感染的藥物頗多,但此菌很易出現多重耐藥菌株。同一菌株可對5-6種甚至更多藥物耐藥,給防治工作帶來很大困難。
上一篇:誌賀菌屬——所致疾病
下一篇:創傷感染的病原微生物鑒別與電鏡圖譜