伯氏疏螺旋體是引起萊姆病的病原體。病原學診斷的主要方法是分離培養、聚合酶鏈反應及血清學實驗。由於分離培養耗時長，所以一般常用ELJSA技術檢測血清中的抗體，結果可疑時，再以免疫印跡技術證實。
【材料】
1、可疑萊姆病患者血清。
2、ELJSA檢測抗伯氏螺旋體lgM抗體試劑盒
（1）伯氏螺旋體41kd鞭毛蛋白抗原包被96孔酶標板。
（2）陽性、弱陽性、陰性對照血清。
（3）標本稀釋液。
（4）酶標抗體（HRP標記羊抗人lgM）。
（5）底物：用磷酸鹽-枸櫞酸緩衝液配置的TMB·H2O2。
（6）反應終止液（1mol/l硫酸溶液）。
（7）洗滌液。
【方法】
1、用標本稀釋液將患者血清按1：100稀釋，即取2ul血清與200ul標本稀釋液混合，置37℃20分鍾。
2、各加100ul陽性、弱陽性、陰性對照及已稀釋待檢標本上清液於相應孔中，空白對照孔加100ul標本稀釋液，蓋好反應板，37℃孵育20分鍾。
3、甩盡板中液體，用200—300ul洗滌液洗5次，每次均需拍幹。
4、每孔加酶標記抗體標抗人lgM抗體100ul，蓋好反應板，37℃孵育30分鍾。
5、甩盡板中液體，洗5次，每次拍幹。
6、加底物TFMB-H2O2 100ul，混勻，37℃溫育15分鍾。
7、加終止液1mol/l硫酸50ul，用酶標儀450nm測其OD值。
【結果】
1、陰性對照平均OD值須<0.20。
2、弱陽性對照平均OD值須在0.20—0.25。
3、弱陽性對照與陰性對照的平均OD值之比須大於或等於2。
符合以上3個條件，本次實驗結果可信，否則重複實驗。
4、若待檢標本孔顯色比弱陽性對照孔深，則判為陽性，即以P/N>2.1為陽性。 756
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