臨床標本結核分枝杆菌檢查主要有直接塗片抗酸染色、細菌培養、聚合酶鏈反應(PCR)、抗體檢測、動物接種等多種方法。直接塗片法即取患者標本直接塗片抗酸染色後鏡檢,此法簡便迅速,但要求標本中結核分枝杆菌量多,並要注意與非結核分枝杆菌區別。開放性肺結核患者的痰中常含有結核分枝杆菌,如取痰液直接塗片、染色鏡檢找到抗酸杆菌,可作初步診斷。
【材料】痰標本、載玻片、石炭酸複紅染色液、3%鹽酸乙醇、美藍染色液、金胺染色液、0.5%氫氧化鈉。
【方法】
直接染色法
1、收集患者清晨咳痰,用接種環挑取痰液中幹酪樣壞死小塊或帶血小塊,製成厚塗片,幹燥後火焰固定。
2、用過的接種環須用75%乙醇充分清洗,或放入沸水中煮沸數分鍾,將接種環上的細菌殺死,然後方可在乙醇燈上進行燒灼滅菌;或者先將接種環置乙醇燈火焰旁烘烤片刻,再置於外焰中燒灼滅菌,嚴禁將取標本後的接種環直接放在火焰上滅菌,以防止痰液受熱後突然炸裂,使尚未死亡的結核分枝杆菌隨之播散。
3、將製好的塗片進行抗酸染色或金胺染色。
4、染色後將塗片置油鏡下或熒光顯微鏡下觀察,注意觀察形態、排列方式及染色性。
濃縮集菌法
【報告方式】
1、直接塗片法的報告方式
-:仔細觀察300個視野(觀察時間不少於4分鍾)未發現抗酸杆菌。
+ -:100個視野內發現1—2個抗酸杆菌。
+:100個視野內發現3—9個抗酸杆菌。
+ +:100個視野內發現10—99個抗酸杆菌。
+ + +:每個視野內發現1—9個抗酸杆菌。
+ + + =:每個視野內發現10個以上抗酸杆菌。
2\集菌塗片應按“發現抗酸杆菌”或“未發現抗酸杆菌”方式報告。
上一篇:分枝杆菌屬的培養特性觀察
下一篇:結核分枝杆菌濃縮集菌法