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塑料板法肥達實驗



錄入時間:2008-12-2 16:22:28 來源:青島betway必威西汉姆联生物

【原理】同試管法。 
【材料】10*6孔塑料板,其他同試管法。  
【方法】 
1、取10*6孔塑料板1塊(每排10孔,共6排),於每排第1孔左側分別標明“H、O、 
A、B”以表示各排孔中將分別加入傷寒沙門菌鞭毛抗原(H)、傷寒沙門菌菌體抗原(O)、甲型副傷寒沙門菌鞭毛抗原(A)、肖氏沙門菌鞭毛抗原(B)。 
2、血清預稀釋取可疑患者血清0.4ml,加至1.2ml0.9%氯化鈉溶液中,混勻即得1:4稀釋的血清。 
3、稀釋血清:用1ml吸管從裝有1.6ml1:4可疑患者血清的試管中吸取0.8ml放入塑料板每排第1孔,每孔0.2ml。再用另一吸管取1.2ml0.9%氯化鈉溶液加入上述試管中作對倍稀釋,即為1:8的血清,另換吸管吹吸混勻,再取0.8ml放入每排的第二孔,每孔0.2ml。如此操作至每排第6孔止。每排孔內血清原始稀釋度分別為1:4、1:8、1:16、1:32、1:64、1:128。 
4、於每排第7孔各加0.9%氯化鈉溶液0.2ml,作為抗原對照。 
5、加抗原於第1排各孔加傷寒沙門菌鞭毛抗原(H),於第2排各孔加傷寒沙門菌菌體抗原(O),於第3排各孔加甲型副傷寒沙門菌鞭毛抗原(A),於第4排各孔加入肖氏沙門菌鞭毛抗原(B),每孔均為0.2ml。加入菌液後,每孔血清又稀釋1倍,故血清最終稀釋度應為1:8、1:16、1:32、1:64、1:128、1:256。 
6、將塑料板輕輕來回搖動,使抗原與血清充分混勻,置室溫下,15min分鍾後觀察結果。記錄方法參見試管法。 
【注意】因塑料板法所用的抗原及血清均較試管法濃縮10倍,因此,在確定血清效價後應擴大10倍,使其與試管法結果報告一致。例如塑料板法為1:8,則報告為1:80.   
   

 

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