驗證用微生物接種菌液的製備，必須使用5代之內的菌種。取驗證（挑戰）微生物菌種（大腸杆菌、金黃色葡萄球菌、生孢梭菌；白色念珠菌等的新鮮培養物）至新鮮瓊脂培養基中（營養肉湯、硫乙醇酸鹽；改良馬丁培養基中），30—35℃培養18—524h；20—25℃培養18—24h（白色念珠菌），試管培養物加入0.9%無菌氯化鈉溶液約5ml或其他適宜的稀釋液，製成濃菌懸液，用上述培養物進行1ml—9ml的10倍係列稀釋，按《中國藥典》（2005年版）規定的平皿菌落計數法測定菌數，製成每毫升含菌10—100菌落形成單位（CFU）的菌懸液。備用。
將黑曲黴菌接種至真菌瓊脂斜麵培養基上，20—25℃培養5—7d，使大量的孢子產生。加入3—5ml0.9%無菌氯化鈉溶液，用玻璃棒將孢子洗脫。然後，用管口帶有能過濾菌絲裝置（如薄的無菌棉花或紗布的無菌毛細吸管）吸出孢子菌液至無菌試管內，用濁度法或《中國藥典》（20058年版）規定的平皿菌落計數法測定菌數，將菌液稀釋至每毫升含10—1010個。備用。
以上確定供試用的菌液（稀釋菌液含10—100CFU/ml）就可作為驗證用接種液，接種液要保存在2—8℃的冰箱內，可於1周內使用，但要求在每次接種時須重新計數，以確證稀釋菌液的準確濃度。
上一篇：驗證實驗用微生物的種類及其生理特性
下一篇：驗證試驗條件——1
