一、器材:
1、菌種
金黃色葡萄球菌和大腸杆菌的染色標本片。
2、儀器或其他用具
目鏡測微尺,鏡台測微尺,載玻片,蓋玻片,顯微鏡,擦鏡紙等。
二、試驗方法
1、校正目鏡測微尺
(1)裝目鏡測微尺:取出目鏡,把目鏡上的透鏡旋下,將目鏡測微尺刻度朝下放在目鏡鏡筒 內的隔板上,然後旋上目鏡透鏡,再將目鏡插入鏡筒內。
(2)校正目鏡測微尺把鏡台測微尺置於載物台上,刻度朝上。先用低倍鏡觀察,對準焦距,視野中看清鏡台測微尺的刻度後,轉動目鏡,使目鏡測微尺與鏡台測微尺的刻度平行,移動推動器,使兩尺重疊,再使兩尺的“0”刻度完全重合,定位後,仔細尋找兩尺第二個完全重合的刻度,計數兩重合刻度之間目鏡測微尺的格數和鏡台測微尺的格數。因為鏡台測微尺的刻度每格長10um,所以由下列公式可以算出目鏡測微尺每格所代表的實際長度。
目鏡測微尺每格長度=兩重合線問鏡台測微尺的格數*10 /兩重合線間目鏡測微尺的格數
例如目鏡測微尺5小格正好與鏡台測微尺1小格重疊,已知鏡台測微尺每小格為10um,則目鏡測微尺上每小格長度為1um*10/5=2um。
用同法分別校正在高倍鏡下和油鏡下目鏡測微尺每小格所代表的長度。
由於不同顯微鏡及附件的放大倍數不同,因此校正目鏡測微尺必須針對特定的顯微鏡和附件(特定的物鏡、目鏡、鏡筒長發)進行,而且隻能在該顯微鏡上重複使用,當更換不同顯微鏡目鏡或物鏡時,必須重新校正目鏡測微尺每一格所代表的長度。
2、測定細菌的大小
移去鏡台測微尺,換上細菌染色標本片,先在低倍鏡和高倍鏡下找到標本後,換油鏡測金黃色葡萄球菌的直徑和大腸杆菌的長度和寬度。測量時,通過轉動目鏡測微尺和移動載玻片,測出細菌直徑或長和寬所占目鏡測微尺的恪數。測出的格數乘上目鏡測微尺每格的校正值,即等於該菌的實際大小。一般測量菌的大小要在同一個標本片上測定10—20個菌體,求出平均值,才能代表該菌的大小。
通常測定對數生長期菌體的大小來代表該菌的大小。
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