一、培養基的用途及原理
用於藥品中洋蔥伯克霍爾德菌群的選擇性培養。
胰蛋白腖、酵母提取物提供細菌生長的基本營養,氯化鈉維持滲透壓,丙酮酸鈉可刺激洋蔥伯克霍爾德菌群的生長,磷酸二氫鉀為緩衝劑,瓊脂為凝固劑,酚紅為酸堿指示劑。稍偏酸的pH使培養基呈現為黃色,培養基中含少量的蔗糖有助於洋蔥伯克霍爾德菌群的生長,由於產酸不多且易被氧化成堿性物質,同時洋蔥伯克霍爾德菌群產堿能力較強,生長時會導致培養基的pH逐漸升高,培養基的顏色由黃色逐漸變為紅色,因此洋蔥伯克霍爾德菌群在此培養基上菌落通常偏紅色,菌落周圍培養基變紅。培養基中添加的慶大黴素、萬古黴素、多粘菌素對多數革蘭氏陰陽性菌都有較強的抑菌效果。
二、成分(g/L)
胰蛋白腖 |
10.0 |
蔗糖 |
2.0 |
酵母提取物 |
1.5 |
結晶紫 |
0.001 |
丙酮酸鈉 |
7.0 |
磷酸二氫鉀 |
1.54 |
氯化鈉 |
5.0 |
酚紅 |
0.02 |
瓊脂 |
14.0 |
慶大黴素 |
0.01 |
萬古黴素 |
0.0025 |
多粘菌素B |
600000U |
pH |
6.2±0.2 |
三、配製方法
稱取本品41.06g,加熱煮沸完全溶解於1000ml純化水中,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15分鍾,冷卻至45℃~50℃時,每200ml培養基中加入1支BCCSA抑菌劑(含慶大黴素2mg,萬古黴素0.5mg,多粘菌素B120000U),混合均勻,傾入無菌平皿,備用。
四、生長現象及結果觀察
接種以下菌株至BCCSA培養基平板,30-35℃需氧培養48-72h。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量/CFU |
生長現象 |
洋蔥伯克霍爾德氏菌 |
CMCC23005 |
10-100 |
培養基變紅 |
新洋蔥伯克霍爾德菌 |
CMCC23006 |
10-100 |
培養基變紅 |
神秘伯克霍爾德菌 |
CMCC23010 |
10-100 |
培養基變紅 |
金黃色葡萄球菌 |
CMCC26003 |
100-1000 |
抑製 |
銅綠假單胞菌 |
CMCC10104 |
100-1000 |
抑製 |
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