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抗生素檢測培養基II的試驗方法與現象

薑斯媛
錄入時間:2024-8-2 16:05:16 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、產品用途

  用於拮抗劑的檢測。


二、試驗原理

  本法是利用抗生素在瓊脂培養基內的擴散作用,抑菌圈直徑與抗生素濃度或活性相關,比較標準品與供試品兩者對接種的實驗菌產生抑菌圈的大小,以測試供試品效價的一種方法。


三、培養基配方(g/L)

蛋白腖

10.0

牛肉粉

3.0

酵母浸粉

3.0

葡萄糖

1.0

氯化鈉

5.0

瓊脂

14.0

  此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果


四、試驗方法

  1、稱取本品36.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15min,備用。

  2、將質控菌株稀釋至合適梯度,製成含菌量10-100CFU/mL的菌懸液。

  3、取平板分別注入加熱融化的培養基20ml,放置水平台上使之凝固,作為底層。另取適量培養基,在48-50℃加入規定菌量的菌懸液,搖勻。在平板中分別加入5ml,使其在頂部攤布均勻,作為菌層,放置在水平台上冷卻凝固。

  4、在凝固的平板中放置牛津杯,用壓杯板壓置10秒。

  5、在每一個小管中加入標準品,轉移至培養箱30℃培養24-36小時。


五、試驗結果

  接種以下質控菌株,在36±1℃培養18-22小時:

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

回收率

生長情況

其他特征

藤黃微球菌

CMCC(F)28001

50-100CFU

/

+++

黃色菌落

  質控結果:


六、注意事項

  1、注入培養基總量不大於20ml,否則放置牛津杯後平皿蓋無法蓋緊。

  2、菌量濃度適宜,若菌量濃度過小,則菌層生長弱做不出抑菌圈

  3、菌層培養基表麵應平整,否則漏液。

  4、牛津杯中央有凸點為正麵。

  5、壓杯板已輻照滅菌,酒精棉擦拭可重複使用。

  6、將平皿轉移至培養箱培養過程中應保持穩定,以免影響實驗效果。


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注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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