一、產品用途
用於拮抗劑的檢測。
二、試驗原理
本法是利用抗生素在瓊脂培養基內的擴散作用,抑菌圈直徑與抗生素濃度或活性相關,比較標準品與供試品兩者對接種的實驗菌產生抑菌圈的大小,以測試供試品效價的一種方法。
三、培養基配方(g/L)
蛋白腖 |
10.0 |
牛肉粉 |
3.0 |
酵母浸粉 |
3.0 |
葡萄糖 |
1.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
瓊脂 |
14.0 |
此配方可以進行改良或增加營養成分以獲得最佳的結果
四、試驗方法
1、稱取本品36.0g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15min,備用。
2、將質控菌株稀釋至合適梯度,製成含菌量10-100CFU/mL的菌懸液。
3、取平板分別注入加熱融化的培養基20ml,放置水平台上使之凝固,作為底層。另取適量培養基,在48-50℃加入規定菌量的菌懸液,搖勻。在平板中分別加入5ml,使其在頂部攤布均勻,作為菌層,放置在水平台上冷卻凝固。
4、在凝固的平板中放置牛津杯,用壓杯板壓置10秒。
5、在每一個小管中加入標準品,轉移至培養箱30℃培養24-36小時。
五、試驗結果
接種以下質控菌株,在36±1℃培養18-22小時:
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
回收率 |
生長情況 |
其他特征 |
藤黃微球菌 |
CMCC(F)28001 |
50-100CFU |
/ |
+++ |
黃色菌落 |
質控結果:
六、注意事項
1、注入培養基總量不大於20ml,否則放置牛津杯後平皿蓋無法蓋緊。
2、菌量濃度適宜,若菌量濃度過小,則菌層生長弱做不出抑菌圈
3、菌層培養基表麵應平整,否則漏液。
4、牛津杯中央有凸點為正麵。
5、壓杯板已輻照滅菌,酒精棉擦拭可重複使用。
6、將平皿轉移至培養箱培養過程中應保持穩定,以免影響實驗效果。
相關產品:
注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。
下一篇:乳糖複發酵培養基的使用方法與原理