一、產品用途及原理:
該培養基用於洋蔥伯克霍爾氏菌的分離培養。
酪蛋白腖和酵母浸粉提供微生物生長所需的碳氮源、維生素和生長因子;乳糖和蔗糖為可發酵的糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓;酚紅為酸堿指示劑;結晶紫可抑製革蘭氏陽性菌的生長;瓊脂為培養基的凝固劑。慶大黴素為廣譜抗生素,對多數假單胞菌屬、變形杆菌屬、大腸菌群、葡萄球菌屬、需氧芽孢杆菌屬等多種革蘭氏陰陽性菌有較強的抗菌活性;萬古黴素可抑製細菌細胞壁的合成,對金黃色葡萄球菌、化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌等作用強,對艱難梭菌、炭疽杆菌、白喉杆菌等作用也良好;多粘菌素B對綠膿杆菌、大腸杆菌、克雷伯氏菌及嗜血杆菌等多種革蘭氏陰性菌有抑製作用。
二、培養基配方(g/L):
Casein Peptone/酪蛋白腖 |
10.0 |
Lactose/乳糖 |
10.0 |
Sucrose/蔗糖 |
10.0 |
Sodium Chiloride/氯化鈉 |
5.0 |
Yeast Extract/酵母浸粉 |
1.5 |
Phenol Red/酚紅 |
0.08 |
Crystal Violet/結晶紫 |
0.002 |
Agar/瓊脂 |
14.0 |
pH值6.8±0.3(25℃) |
三、試驗方法:
1. 稱取本品50.58g,加熱煮沸完全溶解於1000mL蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶200mL,121℃高壓滅菌15分鍾。冷卻至45℃-50℃時,每200mL培養基中加入1支慶大黴素Gentamicin添加劑(2mg)、1支萬古黴素Vancomycin添加劑(0.5mg)和1支多粘菌素B Polymyxin B添加劑(120000U),混勻,傾入無菌平皿備用。
2. 將質控菌株劃線接種於培養基平板上。
3. 放置於恒溫培養箱36℃需氧培養18-24小時,觀察試驗結果。
四、試驗結果判斷:
接種以下質控菌株,放置於36℃需氧培養18-24小時,試驗結果如圖1所示。
質控菌株 |
菌株編號 |
方法 |
質控結果 |
其他特征 |
洋蔥伯克霍爾德氏菌 |
ATCC 25416 |
定性 |
生長良好 |
無色菌落,周圍培養基變紅 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
定性 |
/ |
抑製 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 25923 |
定性 |
/ |
抑製 |
銅綠假單胞菌 |
ATCC 27853 |
定性 |
/ |
抑製 |
圖1 洋蔥伯克霍爾氏菌鑒定培養基微生物質控結果
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