懸浮和運輸培養基的出廠檢驗及驗收方法

一、懸浮和運輸培養基的介紹

  在進行微生物檢驗工作時，經常會用到一些樣品製備或者樣品運輸的培養基，其目的是保證微生物的活性，要求微生物存活並且不能過分增殖，處於相對穩定的一個狀態。用於樣品製備和菌液稀釋的磷酸鹽緩衝液、0.1%蛋白腖水等都屬於懸浮培養基，而用於采樣運輸的Cary-Blair氏運送培養基、Amies運送培養基等都屬於運輸培養基。

二、培養基的出廠檢驗

  待測培養基製備：按照說明書進行配製，分裝至試管，每管10mL（有特殊要求也可選用5mL）。

  1.接種及計數

  菌懸液製備：將質控菌株接種至非選擇性肉湯或平板中進行活化培養，使用生理鹽水或磷酸鹽緩衝液進行十倍係列稀釋至適宜梯度。

  在裝有待測培養基的試管中接種100 CFU～1000 CFU的目標菌，同時接種兩個平行管，混勻後，立即吸取1mL待測培養基混合液，使用非選擇性固體培養基傾注，每管接種1個平板；將剩餘已接種菌液的待測培養基置20℃～25℃放置45min後；再吸取1 mL傾注平板，使用非選擇性固體培養基傾注，將平板置相應溫度下進行培養。

  培養結束後，計數靜置前後平板上的菌落數。

  2.結果判定

  靜置前後菌落數變化應在±50%。

  靜置變化率=（靜置後平板菌落數-靜置前平板菌落數）/靜置前平板菌落數×100%

三、培養基的驗收方法

  菌懸液製備：將目標菌接種至非選擇性肉湯中過夜培養。

  接種：用1μL接種環取一環工作菌懸液直接接種到裝有待測培養基的試管中,混勻後，立即用10μL接種環取一環工作菌培養物劃平行線接種平板，按標準方法中規定的培養時間和溫度培養；剩餘已接種菌液的待測培養基置20℃～25℃放置45min後，再用10μL接種環取一環工作菌培養物劃平行線接種平板，按標準方法中規定的培養時間和溫度培養。

  結果判定：靜置前後接種平板上的目標菌應生長良好。

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