一、用途：
用於蜂蜜中嗜滲酵母菌計數。
添加劑：每瓶需配套添加8盒HB0296-1a氯黴素溶液使用，每支添加於200ml氯硝胺18%甘油(DG18)瓊脂中。
二、實驗原理：
酪蛋白腖提供碳源、氮源、維生素和礦物質；磷酸二氫鉀為緩衝劑；硫酸鎂提供必需的微量元素；葡萄糖提供碳源；氯黴素抑製細菌的生長；瓊脂是培養基的凝固劑；氯硝胺可抑製黴菌菌落蔓延生長；甘油維持一個較低的滲透壓。
三、培養基成分（g/L）：
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酪蛋白腖 |
5.0 |
|
葡萄糖 |
10.0 |
|
磷酸二氫鉀 |
1.0 |
|
硫酸鎂 |
0.5 |
|
氯硝銨 |
0.002 |
|
瓊脂 |
15.0 |
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pH 5.6±0.2 25℃ |
|
四、試驗方法：
稱取本品31.5g,另取無水甘油200g,加熱溶解於1000ml蒸餾水中,分裝三角瓶,每瓶200ml,121℃高壓滅菌15分鍾,冷至50℃左右時,每200ml培養基中加入1支氯黴素溶液(20mg),混勻,傾入無菌平皿,備用。
五、氯硝胺18%甘油(DG18)瓊脂微生物靈敏度試驗:
按標簽用法製備培養基，接種以下質控菌株，放置25±1℃需氧培養48-168h。
注：回收率計算時，用PDA瓊脂做對照培養基。
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量(CFU) |
參比或計數培養基 |
回收率 |
生長情況 |
其他特征 |
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酵母菌 |
ATCC18790 |
10-100 |
PDA |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
|
白色念珠菌 |
ATCC10231 |
10-100 |
PDA |
≥70% |
+++ |
白色菌落 |
|
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
100-1000 |
PDA |
/ |
- |
/ |
不同細菌在氯硝胺18%甘油(DG18)瓊脂上的生長特征：
a：白色念珠菌
b：酵母菌
c：大腸杆菌
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