一、用途及試驗原理:
用於軍團菌硝酸鹽還原試驗。
硝酸鹽培養基中的硝酸鹽可被某些細菌還原為亞硝酸鹽,加入對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑,可與亞硝酸鹽反應,產生一種紅色重氮化合物而呈陽性;硝酸鹽還原的最終產物也因細菌種類不同二不同,包括亞硝酸鹽、氨、分子氮和一氧化碳等。若加入對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑後不變色,再加入少許鋅粉,如果變紅,說明培養基中的硝酸鹽未被細菌還原而仍然存在,被鋅粉還原為亞硝酸鹽後與對氨基苯磺酸和α-萘胺試劑反應顯紅色,則判定為硝酸鹽還原陰性;如果加入鋅粉後仍然不變紅,說明培養基中的硝酸鹽已被還原成亞硝酸鹽,進而分解成氨、氮等產物,判定為硝酸鹽還原陽性。
二、試驗方法:
1.用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈,掰開待用;
2. 將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他製備方法,製備成5 McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液;
3. 吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至生化管中,36±1℃培養24-120h後,觀察試驗結果。
三、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,放置36±1℃培養24-120h:
質控菌株 |
菌株編號 |
生長情況 |
其他特征 |
博茲曼軍團菌 |
ATCC33217 |
+++ |
陰性 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
陽性 |
硝酸鹽肉湯(還原)質控結果
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