芽孢杆菌培養基的補充介紹及注意事項

一、試驗原理與介紹

  芽孢杆菌屬細菌較大（4μm ~10μm），革蘭氏陽性菌，是嚴格需氧或兼性厭氧的有莢膜的杆菌。芽孢杆菌屬可分為以下亞群：多黏芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌（包括蠟樣芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌）、短芽孢杆菌和炭疽芽孢杆菌。

  本培養基用於芽孢杆菌平板計數，葡萄糖為細菌生長提供碳源；氯化鉀可以維持培養基均衡的滲透壓；酵母提取物、硫酸銨為細菌生長提供氮源；磷酸鈣有利於促進細菌芽孢的快速生成，硫酸錳、七水硫酸鎂、硫酸亞鐵提供細菌菌體生長以及芽孢生成所需的微量元素。

二、培養基配方（g/L）

三、試驗方法

  1、稱取本品36.3g，加熱溶解於1000mL蒸餾水中，分裝，121℃高壓滅菌30分鍾備用。

  2、製備菌種懸液，接種至芽孢杆菌培養基上。

  3、放置於36℃±1℃恒溫培養箱中，需氧培養48h-72h。

四、質控要求

  接種以下質控菌株，放置36℃±1℃恒溫培養箱中，需氧培養48h-72h。菌株培養結果見圖1。

圖1 芽孢杆菌培養基的微生物質控結果

五、注意事項

  1、該培養基中含不溶性磷酸鈣，高壓滅菌後存在白色沉澱，倒平板前需充分搖勻培養基，重懸磷酸鈣均勻分布於培養基中，再進行倒平板操作，以免造成平板白色背景不均勻，影響試驗結果。

  2、該培養基倒板後平板整體呈白色，在試驗完畢讀取菌數時可能發生不易辨別計數的情況，可采用置於燈檢箱或打光等方式進行輔助讀數。

  3、芽孢杆菌在挑菌置於稀釋液中振蕩分散的過程中，菌苔不易散開，不易形成均勻態菌懸液，這可能導致後續稀釋塗布結果菌數不穩定或塗布菌數不易掌握，可以通過縮小相鄰稀釋度的稀釋倍數，進行多梯度稀釋度塗布，設立多組平行對照等方式，得到所需的塗布菌數範圍，保證試驗的有效性。

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