一、用途及試驗原理:
該培養基用於化妝品中黴菌總數測定。
胰蛋白腖、䏡蛋白腖和酵母浸粉提供微生物生長所需的碳氮源、維生素和生長因子;葡萄糖為可發酵的糖類;磷酸氫二鈉和磷酸二氫鉀為培養基pH緩衝劑;氯化銨、硫酸鎂和碳酸鈉提供微生物生長所需的離子;氯黴素可抑製細菌的生長;吐溫80可中和防腐劑,同時可起到分散作用;瓊脂為培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L):
胰蛋白腖 |
2.5 |
䏡蛋白腖 |
2.5 |
酵母浸粉 |
5.0 |
葡萄糖 |
20.0 |
磷酸氫二鈉 |
3.5 |
磷酸二氫鉀 |
3.4 |
氯化銨 |
1.4 |
硫酸鎂 |
0.06 |
氯黴素 |
0.1 |
碳酸鈉 |
1.0 |
瓊脂 |
15.0 |
pH值7.0±0.2(25℃) |
三、試驗方法:
1. 稱取本品54.5g,另稱取吐溫80 20mL,加熱溶解於1000mL蒸餾水中,121℃高壓滅菌15分鍾,混勻,傾入無菌平皿。
2. 10倍梯度稀釋法製備質控菌株菌懸液。
3. 吸取質控菌液塗布接種於待測培養基和沙氏葡萄糖瓊脂上。
4. 放置於28℃±1℃需氧培養72h±2h,觀察試驗結果。
四、試驗結果判斷:
接種以下質控菌株,放置於28℃±1℃需氧培養72h±2h,試驗結果如圖1所示。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量 (CFU) |
參比或計 數培養基 |
方法 |
質控結果 |
其他特征 |
白色念珠菌 |
ATCC 10231 |
20-200 |
沙氏葡萄糖瓊脂 |
定量 |
PR≥0.7 |
白色突起菌落 |
酵母菌 |
ATCC 18790 |
20-200 |
沙氏葡萄糖瓊脂 |
定量 |
PR≥0.7 |
白色突起菌落 |
黑曲黴 |
ATCC 16404 |
20-200 |
沙氏葡萄糖瓊脂 |
定量 |
PR≥0.7 |
有黑色孢子 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
/ |
半定量 |
G≤1 |
/ |
圖1 HC瓊脂微生物質控結果
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