一、試驗原理:
用於微生物動力、硫化氫及靛基質試驗。
蛋白腖、胰酪蛋白腖提供生長所必需的營養物質,供微生物生長繁殖利用;瓊脂提供支撐作用,有鞭毛的細菌在穿刺線周圍擴散生長,無鞭毛的細菌則沿穿刺線生長;部分細菌可分解蛋白腖中的色氨酸產生吲哚,吲哚可與對二甲氨基苯甲醛反應形成玫瑰紅色吲哚環,因此加入Kovacs試劑後,顯紅色即為靛基質試驗陽性,無顏色改變則為陰性;微生物還原硫代硫酸鹽或硫酸鹽可產生硫化氫,並與亞鐵離子反應產生黑色沉澱硫化亞鐵,使生化管顯黑色,即為硫化氫試驗陽性。
二、培養基配方(g/L):
蛋白腖 |
6.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
硫代硫酸鈉 |
0.2 |
胰酪蛋白腖 |
20 |
瓊脂 |
3.5 |
硫酸亞鐵銨 |
0.2 |
pH 7.3±0.2 25℃ |
三、試驗方法:
1.由於SIM生化管培養基的瓊脂含量較低,在運輸途中會出現培養基在生化管內斷裂的情況。經過實驗證明,隻需將SIM生化管置於沸水浴中5-10min,等培養基完全融化後,將SIM生化管正放,待培養基重新凝固後,可正常使用。
2.取新鮮質控菌株斜麵,用接種針挑取菌苔穿刺接種至生化管內,30±1℃培養24-48h後,滴加Kovacs試劑,觀察試驗結果。
四、結果觀察與解釋
接種以下質控菌株,30±1℃培養24-48h:
質控菌株 |
菌株編號 |
生長情況 |
其他特征 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC25922 |
+++ |
有動力,H2S-,吲哚+ |
鼠傷寒沙門氏菌 |
ATCC14028 |
+++ |
有動力,H2S+,吲哚- |
單增李斯特氏菌 |
ATCC19114 |
+++ |
有動力,H2S-,吲哚- |
英諾克李斯特氏菌 |
ATCC33020 |
+++ |
有動力,H2S-,吲哚- |
福氏誌賀氏菌 |
ATCC12022 |
+++ |
無動力,H2S-,吲哚- |
圖1-1 SIM生化管質控結果
五、特別說明
SIM生化管培養基斷裂融化再凝固後,不會對實驗結果產生影響。
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