一、試驗原理
本培養基用於致瀉大腸埃希氏菌產毒培養，致瀉性大腸埃希氏菌分為：產腸毒素性大腸埃希氏菌（ETEC）、腸道侵襲性大腸埃希氏菌（EIEC）、腸道致病性大腸埃希氏菌（EPEC）、腸集聚性黏附性大腸埃希氏菌（EAEC）和腸出血性大腸埃希氏菌（EHEC）5種。
酪蛋白腖、酵母浸粉提供氮源、維生素和生長因子；氯化鈉維持細菌平衡的滲透壓；磷酸氫二鉀具有緩衝作用；葡萄糖為可發酵糖類；硫酸鎂促進微生物生長發育；氯化鐵、氯化鈷能促進微生物毒素的產生；林可黴素（潔黴素）用於抑製厭氧菌和革蘭陽性球菌生長，對革蘭陰性菌以及真菌無活性。
二、培養基配方（g/L）
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酪蛋白腖 |
20.0 |
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酵母浸粉 |
10.0 |
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氯化鈉 |
2.5 |
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磷酸氫二鉀 |
15.0 |
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葡萄糖 |
5.0 |
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硫酸鎂 |
0.025 |
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氯化鐵 |
0.0025 |
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氯化鈷 |
0.01 |
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pH 7.5±0.1（25℃） |
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三、試驗方法
1、稱取本品52.54g，加熱溶解於1000mL蒸餾水中，121℃高壓滅菌15分鍾，待冷卻至45℃-50℃左右時，加入過濾除菌的林可黴素溶液（90μg/mL），混勻備用。
2、製備菌種懸液，接種至Honda氏產毒肉湯中。
3、放置於36℃±1℃恒溫培養箱中，需氧培養18h-24h。
四、質控結果
接種以下質控菌株，放置36℃±1℃恒溫培養箱中，需氧培養18h-24h。菌株培養結果見圖1。
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質控菌株 |
菌株編號 |
接種量（CFU） |
生長情況 |
其他特征 |
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大腸埃希氏菌 |
ATCC 8739 |
10-100 |
+++ |
渾濁 |
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大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
10-100 |
+++ |
渾濁 |
圖1 Honda氏產毒肉湯的微生物質控結果
五、注意事項
1、培養基中含少量硫酸鎂、氯化鈷、氯化鐵，滅菌後可能出現微量沉澱。
2、林可黴素屬於林可酰胺類抗生素，121℃高溫易產生分解影響其功效，故采用過濾除菌方式在Honda氏產毒肉湯高壓滅菌冷卻後加入，務必避免一同高壓滅菌。
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