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鳥氨酸脫羧酶肉湯生化管使用方法

李令梅
錄入時間:2023-4-11 13:39:27 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、培養基用途:

  用於細菌鳥氨酸脫羧酶試驗。


二、原理:

  某些細菌可產生賴氨酸脫羧酶,使鳥氨酸脫去羧基,生成腐胺,從而使培養基變堿性並通過指示劑變色來觀察。脫羧酶是適應酶或稱誘導酶,對底物有特異性,在無相對氨基酸的培養基中不產生此酶,並且需要酸性環境和適宜溫度。故在培養基中加入葡萄糖,使細菌發酵葡萄糖產酸,以利於脫羧酶的產生。氨基酸的分解是在厭氧條件下進行,故在培養基表麵加液體石蠟。由於細菌發酵葡萄糖產酸,在培養初期培養基和對照培養基呈黃色,繼續培養時,若氨基酸經脫羧或水解產生胺類則培養基變堿,呈紫色或紫紅色,即為陽性反應;如至培養末期培養基如同對照管一樣均呈黃色,則判為陰性反應。


三、培養基成分

成分

含量(g/L)

蛋白腖

5.0

鳥氨酸

5.0

葡萄糖

1.0

酵母浸粉

3.0

溴甲酚紫

0.016

pH 6.8±0.1 25℃


四、操作方法

  1、用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈,掰開待用;傾注平皿備用。

  2、將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他製備方法,製備成5 McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液;

  3、吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至鳥氨酸脫羧酶生化管和氨基酸脫羧酶試驗對照生化管,36±1℃培養24±2h後,觀察試驗結果。


五、實驗結果

質控菌株

菌株編號

生長情況

其他特征

福氏誌賀氏菌

ATCC12022

+++

陰性,黃色

宋內誌賀氏菌

CMCC(B)51592

+++

陽性,紫色

痢疾誌賀氏菌

CMCC(B)51252

+++

陰性,黃色

大腸埃希氏O157菌

ATCC35150

+++

陽性,紫色

阪崎腸杆菌

ATCC29004

+++

陽性,紫色

鼠傷寒沙門氏菌

ATCC14028

+++

陽性,紫色

普通變形杆菌

CMCC(B)49027

+++

陰性,黃色


鳥氨酸脫羧酶肉湯GS012中


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注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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