一、用途及試驗原理
本培養基一般用於濾膜法檢測和計數水中的腸球菌。
胰蛋白腖、蛋白腖、酵母浸粉提供碳氮源、維生素和生長因子;牛膽汁可以抑製大部分革蘭氏陽性菌的生長;氯化鈉維持均衡的滲透壓;細菌水解七葉苷與檸檬酸鐵銨中鐵離子反應形成黑色的6,7-二羥基香豆素;疊氮鈉抑製其他非目標菌的生長;瓊脂是培養基的凝固劑。
二、培養基配方(g/L)
胰蛋白腖 |
17.0 |
蛋白腖 |
3.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
牛膽汁 |
10.0 |
氯化鈉 |
5.0 |
七葉苷 |
1.0 |
檸檬酸鐵銨 |
0.5 |
疊氮鈉 |
0.15 |
瓊脂 |
13.0 |
pH 7.0±0.1(25℃) |
三、試驗方法
1、稱取本品55.65g,加熱煮沸溶解於1000mL蒸餾水中,分裝,121℃高壓滅菌15分鍾,備用。
2、製備質控菌株,接種到該培養基中。
3、放置於36℃±1℃恒溫培養箱中,需氧培養22h-26h。
四、質控結果
接種以下質控菌株,放置35℃恒溫培養箱中,需氧培養22h-26h。結果如圖1所示。
質控菌株 |
菌株編號 |
接種量 (CFU) |
參比或計 數培養基 |
方法 |
質控結果 |
糞腸球菌 |
ATCC 29212 |
10-100 |
TSA |
定量 |
褐色菌落,周圍變黑 |
屎腸球菌 |
ATCC 27270 |
10-100 |
TSA |
定量 |
褐色菌落,周圍變黑 |
大腸埃希氏菌 |
ATCC 25922 |
/ |
/ |
定性 |
抑製 |
金黃色葡萄球菌 |
ATCC 6538 |
/ |
/ |
定性 |
部分抑製 |
圖1 膽汁七葉苷疊氮鈉瓊脂的微生物質控結果
五、注意事項
培養基中有少量檸檬酸鐵銨,滅菌後可能有微量黑色沉澱,搖勻倒平板即可正常使用。
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