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單克隆抗體的製備與應用



錄入時間:2008-11-3 11:24:37 來源:青島betway必威西汉姆联 

  (一)單克隆抗體的製備  
   單克隆抗體的製備過程如下:用事先設計好的抗原免疫動物(通常是小鼠或大鼠), 使特異B細胞克隆繁殖並產生大量抗體。然後取出富含B淋巴細胞的脾,加入聚乙二醇與骨髓瘤細胞融合,再放入HAT[次黃嘌呤、葉酸和胸腺嘧啶核苷]培養基 中培養,葉酸封鎖細胞 的特殊代謝用途,未融合的骨髓瘤細胞,缺乏使其能在葉酸存在下生長的酶,故不能生長而死亡;而未融合的脾B細胞,雖然具有對中間代謝產物次黃嘌呤和胸腺嘧啶的旁路途徑,但卻不能在體外培養基中生長,而在培養1—2周後也會 自然死亡。隻有經過融合的雜交瘤細胞能夠從融合的同伴細胞那裏獲得進行上述特定旁路途徑代謝的遺傳信息,而在HAT培養基中生 長。細胞經過融合過程以後,將單個融合細胞雜交瘤放在微量滴定板的加樣孔中,逐孔檢測其分泌產生抗體的能力,以確定能產生實驗目標的抗體的雜交瘤細胞。一旦確定雜交瘤細胞以後,它們或被放在HAT培養基中培養或被注射到小鼠體內,作為鼠骨髓腫瘤而永久保存,也可以將它們冷凍,待用時再解凍,重新培養或注射到小鼠體內。 
(二)單克隆抗體的應用 
    單克隆抗體稱為第三代抗體,被譽為“免疫學中的技術革命”,已被廣泛應用於許多領域,並已取得令人矚目的成果。在科研和藥學研究中,它是重要的研究試劑,可以用來識別、檢測和分離外來的抗原;在疾病的臨床診斷中,它是非常靈敏的鑒定方法,常用於各種傳染病的臨床診斷,如乙型肝炎、衣原體疾病等的診斷;在疾病治療中,它是有力的治療武器,已被製成“藥物導彈”,成功應用於某些腫瘤疾病的治療,或大大降低毒素對正常細胞的傷害。目前 已製成了針對淋巴瘤、肝癌、結腸癌、乳腺癌和骨癌等10餘種癌症的單克隆抗體。 

 

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