固體培養,就是利用固體培養基進行微生物的繁殖,由於微生物貼附在營養基質表麵生長,所以又稱表麵培養。實驗室固體培養方法用於菌種的分離、純化、保藏和生產種子的製備,常見方法如下
1、適用於好氧和兼性好氧微生物的培養
(1)平板劃線培養方法:
用接種針蘸取菌樣;在平板固體培養基表麵劃線。
(2)平板塗布培養法:
用塗布棒將少量的液體培養物塗布在整個固體培養基表麵。
(3)將少量液體培養物與融化後降溫至46~50℃的固體培養基混勻,倒入培養皿中,澆注成平板。接種後的培養物直接放入培養箱中恒溫培養。
(4)斜麵接種培養法:
接種針火焰灼燒滅菌;管口置近火怕處;用接種針隨取幽樣後,移到斜麵上劃線。接種後的培養物直接放入培養箱中恒溫培養。
2、適宜於微好氧微生物生長
穿刺接種:玻管中加入固體培養基,滅菌後將蘸取菌樣的穿刺接種針(頭部無環)垂直插人固體培養基內,再原路拔出。然後塞上橡皮塞。越靠近培養基深處越缺氧,生長的菌厭氧程度越高。
3、適用於厭氧菌培養
(1)在斜麵接種後,將培養管棉塞上部截去或用火點著燒掉,用玻璃棒將管內部分的棉花壓至離培養基1cm處,棉塞上方再壓入一含水的脫脂棉,加入1:1比例混合的焦性沒食子酸和碳酸的粉未,立即加上橡膠塞。焦性沒食子酸和碳酸鈉在有水的情況下,緩慢作用,吸收氧氣,放出CO2造成無氧環境。
(2)將厭氧微生物固體培養物放在真空幹燥器內,用泵排出其中的空氣,並可進一步向其中充人氮氣或95%氮氣和5%二氧化碳的混合氣體,再放置一定的溫度環境中培養。
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