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如何判斷一個培養基的穩定性及進行保存

紀旭豔
錄入時間:2022-8-18 16:10:04 來源:青島betway必威西汉姆联生物

  在平常的實驗中,我們經常會遇到一個情況:配製了200mL培養基,實際上隻用了50mL培養基,那剩下的培養基是否能下次使用?或者應該保存在什麽條件下可下次繼續使用?主要從以下兩個方麵判斷:

  (1)汙染的可能性。主要考慮使用過程和保存過程綜合考量是否有較大的汙染可能性,若存在汙染風險,不建議繼續留用。(注:培養基不可重複滅菌)

  (2)培養基成分的穩定性。根據培養基的組分穩定性,也可大致判斷培養基是否易於長時間或短時間儲存。

  注:嚴格來講,培養基的儲存條件及時間應由相應的效期試驗得出,本文章的方法僅用於大致判斷培養基的穩定性。


一、培養基中較穩定成分

  (1)穩定的無機鹽(不參與氧化還原反應):如磷酸鹽、氯化鈉、氯化鉀等,對光熱不敏感,通常也不與其他成分發生氧化還原反應,在培養基的長期存放過程中不會發生變化。

  (2)瓊脂:瓊脂在中性常溫環境下較為穩定,在培養基中僅做為凝固劑,因此在適宜的保存條件下,瓊脂通常也不會發生明顯變化。

  注:酸性條件和結冰會破壞瓊脂結構,若培養基長期保存過程中未密封,則瓊脂會逐漸失水變幹。


二、相對穩定的成分

  (1)蛋白腖、酵母浸粉、牛肉浸粉等營養成分:這些營養成分提供微生物生長所需的碳氮源、維生素等,可耐短時間的高溫滅菌,相對較為穩定。但內含的維生素在長時間的高溫和見光條件下仍然會逐漸分解,短期內(不超過1個月)的室溫保存通常不會有問題,若需要長期保存,應放置陰涼處或冷藏避光保存。

  (2)糖醇苷類:在培養基中主要提供碳源,種類繁多,有一些相對穩定,但在高溫滅菌後,會逐漸發生焦化現象,導致培養基pH下降。在培養基含糖量不高於5g/L的情況下,短時間內通常不會有明顯變化,若培養基同時含有磷酸鹽穩定培養基的pH,則更有利於培養基的長期存放。


三、不穩定成分

  (1)抗生素類:有些抗生素不耐高溫,配製時隻能過濾除菌,對光和熱敏感,但也有一些抗生素非常穩定,如氯黴素、萘啶酮酸等,在高溫下不分解。含有抗生素類的培養基通常應保存在2-8℃。

  (2)天然成分:如卵黃、血液、血清等不穩定成分,通常需現配現用,短期保存需放置在2-8℃,不建議長期保存。

  (3)氧化還原性成分:如亞鐵離子、半胱氨酸、巰基乙醇酸鈉等,易被空氣氧化,需密閉保存。

  (4)染料/酸堿指示劑:帶顏色的染料通常對光比較敏感,見光易褪色,應注意避光保存。

  (5)不穩定的鹽:如亞硒酸氫鈉、亞硫酸鈉、碳酸氫鈉等,易分解或被氧化還原等,含此類成分的培養基應現配現用或冷藏保存。


總結:

  若培養基中的成分相對比較穩定,可在室溫短期存儲或冷藏長期儲存;

  若培養基中含有不穩定成分,應現配現用或在2-8℃短期存儲。


注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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