一、試驗原理:
大腸杆菌/大腸菌群顯色培養基(第二代)是青島betway必威西汉姆联生物公司再次改良的培養基,用於食品、水、牛奶、冰激淩和肉製品中大腸杆菌和大腸菌群的快速檢測。大腸杆菌和大腸菌群分別具有特異性的酶,利用其分解底物得到產物的不同來區分大腸杆菌和大腸菌群。大腸杆菌顯藍色至紫色,大腸菌群顯紅色,革蘭氏陽性菌被抑製。
二、培養基配方(g/L):
特殊營養物質 |
33.0 |
顯色劑 |
0.3 |
瓊脂 |
13.0 |
pH 6.8-7.2 25℃ |
三、試驗方法:
1.稱取本品46.3g加入1000ml蒸餾水,加熱溶解並不停攪拌,煮沸不要超過1分鍾。取1ml製備好的樣品液加入直徑為9cm無菌平皿中心,傾入冷卻至45-50℃ 培養基約15ml,混勻,凝固後,再加入一層培養基進行履蓋。 或冷卻至45-50℃時,傾入無菌平皿,瓊脂完全凝固後,在37℃的培養箱中倒置放置1-2小時,加入適當稀釋度的樣品液1ml,塗布於培養基上,36℃培養18~24h。
2.選用有30~200個菌落的平板,計數平板上出現的典型大腸菌群和大腸杆菌菌落。大腸杆菌典型菌落為藍色至紫色,大腸菌群為粉紅色菌落,其它細菌為無色或黃色菌落;
總大腸菌群=藍色菌落+紫色菌落+粉紅色菌落
大腸杆菌=藍色菌落+紫色菌落。
3.對可疑大腸杆菌菌落可劃線接種到營養瓊脂平板上,36℃培養12-16小時,挑取單菌落做大腸杆菌全套生化試驗(本公司有生化鑒定管套裝4種x4套)。
四、結果觀察與解釋
在36℃培養18~24h小時:
質控菌株 |
ATCC |
生長情況 |
菌落顏色 |
金黃色葡萄球菌 |
25923 |
-/+ |
無色 |
大腸杆菌 |
25922 |
+++ |
藍色 |
沙門氏菌 |
14028 |
+++ |
無色 |
陰溝腸杆菌 |
23355 |
+++ |
粉紅色 |
產氣腸杆菌 |
35029 |
+++ |
粉紅色 |
弗氏檸檬酸鹽杆菌 |
43864 |
+++ |
粉紅色 |
肺炎克雷伯氏菌 |
10031 |
+++ |
粉紅色 |
圖1典型特征:大腸杆菌典型菌落為藍色至紫色,大腸菌群為粉紅色菌落,其它細菌為無色菌落。
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