中文版  |   English  |   加入收藏  |   客服熱線:400-0532-596
微生物技術資料
文章檢索

華農3號培養基



錄入時間:2022-3-9 16:25:22 來源:現代微生物培養基和試劑手冊

【原理】

  本培養基在華農1號培養基基礎上又加入新鮮製備的腦心浸液及新鮮骨膠酶消化液製成,在此培養基上豬痢疾密螺旋體生長成較厚的菌苔,適於製備抗原或菌苗之用。


【成分】

濃縮1.6倍牛肉浸汁
625ml
濃縮2.5倍腦心浸液
50ml
濃縮2.5倍骨膠汁消化液
200ml
胰蛋白䏡(Oxoid)
10g
胰蛋白腖(Oxoid)
5g
大豆蛋白腖(上海東海製藥廠)
5g
水解乳蛋白(Lactalbumin hydrolysate,Oxoid)
5g
氯化鈉
5g
瓊脂粉(日本進口分裝)
15g
蒸餾水
1000ml
Spectam(溶於10ml滅菌蒸餾水內)
800mg
無菌脫纖牛血
50ml

【製法】

  1.濃縮(1.6)牛肉浸汁製備:取絞碎新鮮牛肉500g加蒸餾水625ml,冷浸過液,次日煮沸1小時並用蒸餾水補充至原量後,用紗布棉花過濾,滅菌冷卻後,貯存於-20℃備用。

  2.濃縮(2.5)腦心浸液製備:取切碎牛腦(或絞碎牛心)200g,加蒸餾水160ml,置4~6℃冷浸過夜,次日置45℃水浴1小時,再煮沸30分鍾,用蒸餾水補充至原量,以洗淨玻璃棉過濾(牛心浸液可用濾紙過濾),再取上述腦浸液40ml,加心浸液50ml即成濃縮2.5倍腦心浸液。經121℃滅菌15分鍾,冷卻後,貯存於-20℃備用。

  3.濃縮(2.5)骨膠消化液製備:取牛的管骨(切斷使露出骨髓),軟骨和腱(切斷)1000g,加蒸餾水800ml,40℃冷浸24小時,高壓滅菌(121℃,30分鍾~1小時),然後棄骨頭,再煮開並用雙層紗布過濾去渣,濾液經冷卻後,用虹吸法除去油脂,然後置40℃24小時後,再次去脂即成濃縮骨膠液。消化方法如下:將胰酶溶液(結晶胰酶0.5g, NaHCO32g,蔗糖0.5g,溫蒸餾水74ml,置37℃水浴溶解即成)加入到預熱至37℃400ml骨膠液中,置37℃溫箱消化16~48小時(其間振蕩數次),再置4℃冰箱過液(此時消化液已不結凍成膠狀),然後任沸水浴中煮沸15~20分鍾,以停止酶的作用。此消化液經煮沸後顯示出在微帶淡黃的清亮液體中有白色絮狀沉澱,再濾紙過濾後得到微黃色透明清亮的骨膠汁消化液,滅菌待冷後置-20℃貯存備用。

  4.華農3號培養基的配製:將上述各成分(除蒸餾水Spectam牛血外)加溫溶解後,以蒸餾水補足至1000ml,調整至pH7.3±0.5,121℃滅菌15分鍾後,置溫水浴中冷卻至50℃左右,加入 Spectam 溶液及無菌脫纖牛血,混勻後,傾注平皿製成5~7mm的平皿培養基備用。


【用途】

  用於大量培養豬痢疾密螺旋體作抗原或生產菌苗。


【注意事項】

  1.本培養基應傾注成5~7mm的瓊脂平皿基,在這種較厚的瓊脂平皿上豬痢疾密螺旋體生長成較厚菌苔。

  2.如用純菌種大量製備抗原,培養基中可不加 Spectam

  3.用鉑耳釣取菌種時,宜在生長豐厚處刮取較多菌種在本培養基上劃密線於整個培養基表麵,然後置含有冷鈀催化劑“105”及 CO2:H2=20:80的厭氧罐中培養4~5天,可得到大量的密螺旋體培養物。

 

上一篇:橋壩式選擇培養基

下一篇:華農2號培養基

首頁 | 關於我們 | 網上商城 | 在線客服 | 聯係我們
業務聯係電話
   400-0532-596 0532-66087773
   0532-66087762 0532-81935169
郵箱:qdhbywg@vip.126.com
地址:青島市城陽區錦匯路1號A2棟
產品技術谘詢
  工作日(周一至周六8:00-18:00):
  18562658263 13176865511
  其它時段:13105190021
投訴與建議:13105190021 13006536294