7.5%氯化鈉肉湯原理及使用方法

一、試驗原理：

  用於金黃色葡萄球菌的選擇性增菌培養。

  蛋白腖和牛肉浸粉提供碳源、氮源、維生素和礦物質；較高濃度的氯化鈉提供較高的滲透壓，抑製大多數非葡萄球菌的微生物。

二、培養基配方（g/L）：

三、試驗方法：

 1、培養基製備：稱取本品90.0g， 加熱溶解於1000ml蒸餾水中，分裝三角瓶或試管，121℃高壓滅菌15分鍾，備用。製備好的液態培養基保存於2-8℃，應避免光線直接照射。幹燥培養基應放置於陰暗幹燥處，室溫保存。

 2、製備質控菌液。

 3、接種

  3.1混合菌的接種

  在裝有待測培養基的試管中接種10-100CFU的目標菌，並接種1000-5000CFU的非目標菌，接種總量1ml，同時接種兩個平行管，混勻。同時分別將目標菌菌懸液（與試管接種同一稀釋度）和非目標菌菌懸液（比試管接種小10-100倍稀釋度）1ml傾注平板，接種兩個平板，作接種量計數用，36±1℃培養18-24小時。

  3.2非目標菌接種

  在裝有待測培養基的試管中接種1000-5000CFU的非目標菌，接種量1ml，同時接種兩個平行管，混勻，36±1℃培養18-24小時。

 4、培養液的接種

  4.1混合菌培養液的接種

  用10μL接種環取1環經培養後的混合菌培養液，換線接種到Barid-Parker上，每管接種一個平板，36±1℃培養45-48小時。

  4.2非目標菌培養液的接種

吸取10μL經培養後的非目標菌培養液，均勻塗布接種到TSA上，每管接種一個平板。也可使用傾注法進行接種，36±1℃培養18-24小時。

 5、記錄實驗結果

  目標菌在選擇性平板上的菌落應>10CFU，則表示待測液提培養基的生長率良好；非目標菌在非選擇性平板上的菌落<100CFU，則表示待測液體培養基的選擇性為良好。

四、結果觀察與解釋

  接種以下質控菌株，放置36±1℃需氧培養18-24小時：

圖1 7.5%氯化鈉肉湯微生物質控結果

備注：a：金黃色葡萄球菌(ATCC25923)，b：金黃色葡萄球菌(ATCC6538)，c：大腸埃希氏菌，d：空白

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