將宿主菌(如大腸杆菌、福氏誌賀氏菌、副溶血弧菌、傷寒沙門氏菌、霍亂弧菌、不凝集弧菌等)於相應的瓊脂平皿上劃線分離,置37℃培育16~18小時。取單個菌落與相應的血清凝集,血清凝集反應陽性者,轉種肉湯振蕩(或靜止)培養4~6小時,然後再轉種克氏瓶斜麵,37℃培養18~20小時後。每隻克氏瓶加滅菌蒸餾水15~20ml和玻璃珠20粒(直徑5mm),反複搖動,洗脫菌苔。並經3000rpm離心40分鍾(如此反複2~3次)除去培養基中殘餘的營養物質。再用細菌濁度計比濁法,或活菌計數法,將濃厚的菌液稀釋成400億/ml,供試驗用。
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