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甘露醇卵黃培養基基礎原理和使用方法

丁鑫鑫
錄入時間:2021-10-20 10:36:43 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、試驗原理:

  用於分離培養病原性金黃色葡萄球菌。

  蛋白腖和牛肉粉提供氮源、維生素和生長因子;D—甘露醇為可發酵糖類;7.5%濃度氯化鈉可抑製除葡萄球菌外的大部分微生物的生長;瓊脂是培養基的凝固劑;酚紅為pH指示劑,金黃色葡萄球菌可分解培養基中的甘露醇產酸,使菌落周圍變黃,並能降解卵黃中的卵磷脂使菌落產生暈圈。


二、培養基配方(g/L):

蛋白腖

10.0

D-甘露醇

10.0

牛肉粉

2.5

氯化鈉

75.0

酚紅

0.025

瓊脂

15.0

pH 7.4±0.2 25℃


三、試驗方法:

  粉體裝培養基的使用:

  1. 稱取本品112.5g,加熱攪拌溶解於1000ml蒸餾水中,煮沸1分鍾,121℃高壓滅菌15分鍾,待培養基冷卻至45-50℃時,無菌操作,加入50%卵黃乳液30ml,搖勻,傾入無菌平皿,備用。

  2. 製備質控菌液。

  3. 選擇合適稀釋度的質控菌液0.1ml,均勻塗布於平板上,每一稀釋度接種兩個平板。用1μL接種環取非目標菌質控菌液1環,將接種環接觸容器邊緣3次去除多餘液體,在平板表麵劃六條平行直線,同時接種兩個平板。

  4. 36±1℃需氧培養24-48小時,記錄實驗結果。


四、結果觀察與解釋

  接種以下質控菌株,36±1℃需氧培養24-48小時:

質控菌株

菌株編號

接種量(CFU)

參比或計數培養基

方法

質控評定標準

其他特征

大腸埃希氏菌

ATCC25922

/

/

半定量

G≤1

/

傷寒沙門氏菌

ATCC14028

/

/

G≤1

/

金黃色葡萄球菌

ATCC6538

20-200

TSA

定量

PR≥0.7

黃色菌落,菌落周圍有暈圈

金黃色葡萄球菌

ATCC25923

20-200

PR≥0.7

黃色菌落,菌落周圍有暈圈

表皮葡萄球菌

CMCC(B)26069

20-200

PR≥0.7

紅色菌落,沒有暈圈




圖1-1 甘露醇卵黃培養基微生物質控結果


五、注意事項:

  本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。


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注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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