【原理】
熒光素染色和普通染料染色法主要不同點就是熒光素染色法敏感性高,抗酸分支杆菌能與熒光染料金胺“O”結合,而金胺“O”是一種能產生強熒光的熒光色素,並具有選擇性,結核菌是帶有陰電荷的微生物,而熒光色素金胺“O”是一種含有自由氨基的金黃色堿性染料,它的離子帶有陽電荷,因此金胺“O”能和帶陰電荷的抗酸杆菌結合而著色,在熒光顯微鏡中的高壓汞燈的紫藍光照射激發下,使帶金胺“O”染色的結核菌發出很強的桔黃色熒光,檢查時用高倍鏡即可查見明亮細菌。
【成分及製法】
1. 金胺“O”基礎液:取金胺“O”1.0g溶於95%乙醇100ml中,置褐色瓶中可長期保存。
2. 金胺“O”應用液:取上述基礎液10ml加5%石炭酸液90ml,傾入褐色瓶中可保存兩周。
3. 3%鹽酸酒精脫色劑:取75%酒精97ml加入3ml濃鹽酸。
4. 酸性複紅溶液:取酸性複紅1.0g加冰醋酸1ml再加蒸餾水500ml。
【用途】
用於結核標本的快速檢驗和其它抗酸菌的鑒定。
【用途】
將固定好的塗片加金胺“O”應用液染5分鍾,水洗後加鹽酸酒精脫色20秒鍾,水洗後加酸性複紅複染30秒鍾,然後水洗,自然幹後鏡檢。
【注意事項】
用高倍熒光鏡觀察(10×40)要求24小時內鏡檢完畢,延長時間,熒光亮度下降,影響檢出陽性結果,結核杆菌發黃綠色熒光,亮度清晰,邊緣清楚輪廓正整,菌體典型,細長微彎色條均勻。其它物質及細菌絕大多數不著熒光,但也有少數著熒光物質呈逗點狀熒光,亮度明暗不均,不規則,邊緣不正齊,易與抗酸菌區別。
(吉林省結核病醫院檢驗科 李桂中供稿)
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