葡萄糖酸鹽試驗原理與方法

一、試驗用途及原理：

  此試驗常用於綠膿杆菌和雙歧杆菌的生化鑒定。

  蛋白腖和酵母粉提供基本營養需求；磷酸氫二鉀調節培養基的pH；葡萄糖酸鉀可被某些細菌分解成還原性的葡萄糖，然後與班氏試劑發生反應生成磚紅色沉澱。

二、培養基配方（g/L)

  班氏試劑配方（g/L)

  1.挑取待測菌的單菌落至無菌生理鹽水中，製備約10⁹CFU/mL濃度菌懸液。

  2.吸取100微升菌懸液加入到葡萄糖酸鹽生化管中，並放置於36±1℃，需氧條件下培養24±2小時（若培養雙歧杆菌，需厭氧培養）。

  3.培養結束後按1:1的比例加入班氏試劑，並將生化管置於沸水浴中水浴1-10分鍾，冷卻後觀察結果。如出現磚紅色沉澱，則為陽性；若顏色依為淺藍色，則為陰性。

三、實驗結果：

質控菌株	菌株編號	接種量 （CFU)	參比或計 數培養基	方法	生長 情況	其他特征
大腸埃希氏菌	ATCC25922	＞5000	/	定性	+++	(+)磚紅色(滴加班氏試劑)
銅綠假單胞菌	ATCC27853	＞5000	/	定性	+++	(+)磚紅色(滴加班氏試劑)
銅綠假單胞菌	ATCC9027	＞5000	/	定性	+++	(-)淺藍色(滴加班氏試劑)

a：大腸埃希氏菌ATCC25922；b：銅綠假單胞菌ATCC27853；c：銅綠假單胞菌ATCC9027；d：空白對照

圖1 葡萄糖酸鹽試驗

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