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尿素酶生化管原理及實驗現象

王永興
錄入時間:2021-8-23 13:55:28 來源:青島betway必威西汉姆联生物

一、用途:

用於細菌尿素酶反應。


二、實驗原理:

產尿素酶的細菌分解尿素後產氨,pH上升培養基呈堿性,酚紅為酸堿指示劑,變色範圍為pH6.8-8.4,顏色由黃色變為紅色。因此培養基顏色由橙色變為玫紅色為尿素酶試驗陽性。大多數尿素酶陰性細菌會分解培養基中少量的葡萄糖產酸,使培養基變黃,也有少數尿素酶陰性的細菌不分解葡萄糖,無顏色變化。培養基出現變黃或不變色均為尿素酶陰性反應。


三、培養基配方(g/L):

蛋白腖
1.0
葡萄糖
1.0
氯化鈉
5.0
磷酸氫二鉀
2.0
20%無菌脲溶液
100mL
酚紅
0.012
pH 6.9±0.1 25℃

四、試驗方法:

  1、用磨砂輪在安瓿瓶頸部劃線一圈,掰開待用。

  2、將標準儲備菌株接種到非選擇性肉湯中或采用其他製備方法,製備成5 McFarland濁度(約109CFU/ml)的菌懸液。

  3、吸取0.05ml-0.08ml(約1-2滴)菌懸液至生化管中,36±1℃培養24-120h後,觀察實驗結果。


五、結果觀察與解釋 :

  接種以下質控菌株,36±1℃培養24-120h:

質控菌株
菌株編號
生長情況
其他特征
單增李斯特氏菌
ATCC19114
+++
陰性,黃色
大腸埃希氏菌
ATCC25922
+++
陰性,黃色
普通變形杆菌
ATCC13315
+++
陽性,玫紅色
奇異變形杆菌
ATCC14153
+++
陽性,玫紅色
鼠傷寒沙門氏菌
ATCC14028
+++
陰性,黃色


圖1-1  尿素酶生化管質控結果

備注:a:單增李斯特氏菌,b:大腸埃希氏菌,c:普通變形杆菌,d:奇異變形杆菌,e:鼠傷寒沙門氏菌,f:空白對照


六、注意事項:

本培養基僅為細菌鑒定的一部分,需做其他補充試驗。


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注:本文屬betway必威西汉姆联生物原創,未經允許不得轉載。

 

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