神奈川試驗-我妻氏培養基的使用

一、試驗原理

  副溶血性弧菌在普通血平板上不溶血或隻產生α溶血。但在特定條件下，某些菌株在含高鹽（7%）的人O型血或兔血以及D-甘露醇做為碳源的我妻氏瓊脂平板上可產生β溶血，稱為神奈川現象。

  神奈川試驗結果與副溶血性弧菌的致病性顯著相關，該試驗常用來判斷菌株的毒力強弱。副溶血性弧菌有845個血清型，主要通過十三種耐熱的菌體抗原(即O抗原)鑒定，而七種不耐熱的包膜抗原(即K抗原)可以用來輔助鑒定。其致病力可用神奈川試驗來區分。神奈川試驗陽性菌的感染能力強，多數毒性菌株為神奈川試驗陽性(K+)，多數非毒性菌株為神奈川試驗陰性(Kˉ)。引起食物中毒的副溶血性弧菌90%神奈川試驗陽性，通常在12h內出現症狀。K+菌株能產生一種耐熱型直接溶血素，Kˉ菌株能產生一種熱敏型溶血素，而有些菌株能產生這兩種溶血素。

  培養基中的蛋白腖和酵母粉提供營養；磷酸氫二鉀為pH緩衝劑；7%含量的氯化鈉及甘露醇做為碳源，為副溶血性弧菌溶血現象提供條件；結晶紫可抑製部分耐鹽性、β溶血的葡萄球菌的生長，瓊脂為凝固劑。

二、培養基成分及使用方法：

1. 培養基成分

2. 使用方法

  稱取本品 11.3g，加熱溶解於100ml蒸餾水中。加熱至100℃保持30分鍾（可沸水浴30min）。冷卻至50℃左右時，按5%的體積加入新鮮兔血球，充分搖勻，傾注無菌平板備用。

三、質控方法

1、按使用方法製備培養基，用接種環挑取以下質控菌株固體培養物點種於表麵幹燥的平板，於37℃需氧培養18-24小時。

2、副溶血性弧菌和溶藻弧菌在培養基上的生長情況如下圖所示：

副溶血性弧菌菌落周圍有透明的β溶血環，溶藻弧菌菌落周圍無溶血環。

四、注意事項

  在製備培養基的過程中，添加兔血球時，應先將兔血球溶液預熱至40-50℃左右，再加入至冷卻至50℃左右的培養基中。若二者溫差過大，易在培養基中產生凝塊；加入兔血球後應輕輕搖勻倒平板，若搖晃幅度過大易出現大量氣泡，倒出的平板不平整；平板不宜過厚，2-3mm為宜，方便觀察溶血環。

相關產品： 

我妻氏培養基基礎-點擊查看產品詳情

我妻氏血瓊脂平板（9cm）-點擊查看產品詳情

注：本文屬betway必威西汉姆联生物原創，未經允許不得轉載。

上一篇：4-甲基傘形通葡糖苷酸（MUG）培養基試驗原理及試驗結果

下一篇：尿素酶生化管原理及實驗現象